facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Wiki
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СРОКОВ РАЗВИТИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ НЕФРОПАТИИ У КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Автор Доклада: 
Лазарев К.Л., Сатаева Т.П.
Награда: 
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СРОКОВ РАЗВИТИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ НЕФРОПАТИИ У КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

УДК 616.89 - 008.454:512-013

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СРОКОВ РАЗВИТИЯ АЛКОГОЛЬНОЙ НЕФРОПАТИИ У КРЫС В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Лазарев Константин Леонидович, д-р мед. наук, проф.
Сатаева Татьяна Павловна, аспирант
Крымский государственный медицинский университет им. С.И. Георгиевского


В данной статье описан характер основны ультрамикроскопических изменений в единственной почке экспериментальных животных на разных сроках хронической алкогольной интоксикации 40% этанолом. Начальные проявления алкогольной нефропатии проявляются уже с первой недели алкоголизации и достигают максимального проявления ко 2-3-му месяцам. При этом резко замедляется процессы компенсаторной гипертрофии почки.
Ключевые слова: почка, 40% этанол, ультрамикроскопия, дистрофия.

This article describes the main character of ultramicroscopic changes in a single kidney of experimental animals at different stages of chronic alcohol intoxication by 40% ethanol. Initial manifestations of alcohol nephropathy occur since the first week of alcohol abuse and reach a maximum display to 2-3rd month. This dramatically slows down the processes of compensatory hypertrophy of the kidney.
Key words: kidney, 40% ethanol, ultramicroscopy, dystrophy.

 Диагностика алкогольной болезни может представлять трудности [3]. С целью ранней диагностики хронической алкогольной интоксикации используют ее маркеры — клинические и лабораторные признаки, которые нередко наблюдаются при длительном употреблении алкоголя. Ни один из этих признаков в отдельности не является достоверным критерием наличия алкогольной интоксикации [3,4]. Применение алкоголя индуцировало в опыте у животных с двумя почками развитие типичного острого алкогольного тубулоинтерстициального нефрита. В литературе не найдены данные о морфофункциональном состоянии единственной почки под влиянием алкоголя на ультрамикроскопическом уровне, которые наиболее достоверно отображают стадийность патологического процесса [1,2,5].
Цель данного исследования - выявить характер ультрамикроскопических изменений в единственной почке экспериментальных животных на разных сроках хронической алкогольной интоксикации 40% этанолом.

Материал и методы исследования

Эксперимент состоял в удалении левой почки при сохранении другой. Нефрэктомия выполнялась под эфирной анастезией. После обработки антисептиком кожных покровов производилась срединная лапаротомия. Из забрюшинного пространства в рану выводиласть левая почка, и после перевязки образований почечной ножки производилась нефрэктомия. Рана послойно ушивалась, место разреза обрабатывалось антисептиком. Выполнялось послеоперационное ежедневное одноразовое внутрижелудочное зондовое введение 40% этанола из расчета 10 мл/кг массы тела животного в течение 3-х месяцев.
Для проведения электронной микроскопии, материал готовил¬ся по общепринятой методике: кусочки ткани почки размером 1x1x1 мм вырезались на восковой дощечке и фиксировались в рас¬творе глютаральдегида с концентрацией 2,5%, приготовленном на фосфатном буфере (рН - 7,2-7,4). Результаты дополнительных исследований подвергали математической обработке с использованием вариационно-статистических методов, дисперсионного и корреляционного анализов.

Результаты и их обсуждение

Введение белым крысам 40% раствора этанола оказало токсическое влияние на ткани почки в процессе ее компенсаторной гипертрофии. Выявилось отставание в весе подопытных животных и массе оставшейся почки по срокам наблюдения по сравнению с контролем. Выявляется отставание в весе подопытных животных. К концу первой недели масса тела белых крыс достоверно снизилась до 168,66±6,33 г (рк < 0,05). Через две недели масса тела животных возросла, но осталась недостоверно меньше массы тела в норме (179,22±9,29 г). Только через 1 месяц масса тела животных достигла показателей интактных крыс.
По данным ультрамикроскопии к первой неделе алкоголизации отмечаются первые признаки алкогольной нефропатии, однако на этом сроке компенсаторные процессы преобладают. Визуализируются базальные части эпителиальных клеток канальцев с хорошо видными складками плазмалеммальной мембраны, между которыми расположены митохондрии с плотно упакованными и четко контурированными кристами. Ядра клеток неправильной формы за счет формирования выпячиваний и инвагинаций, в нем отмечается частичное перераспределение хроматина за счет его конденсации вблизи ядерной мембраны. В цитоплазме видно большое количество некрупных митохондрий с матриксом средней электронной плотности и однонаправлено расположенными кристами, так же отмечается наличие рибосом, полисом и канальцев гранулярной ЭПС. Имеется большое количество крупных лизосом, расположенных равномерно по всей цитоплазме. В апикальной части клеток видны вакуолеподобные образования (рис.1).

Рис. 1. Ядро фибробласта (Фб) овально-вытянутой формы с расположением хроматина преимущественно вблизи ядерной мембраны; в циоплазме видны вакуоли. Отмечается значительное разрастание коллагеновых волокон (КВ). Базальная мембрана (БМ) неравномерно утолщена. В базальной части цитоплазмы эпителиальных клеток видны единичные лизосомы (Л). Ув. х1800

К третьей неделе алкоголизации (рис.2). в эпителии дистальных канальцев отмечается наличие вакуолеподобных образований в базальной части клеток, что свидетельствует о явлениях дистрофии. Цитоплазма клеток повышенной электронной плотности. Ядра приобретают неправильную форму. Хроматин, преимущественно конденсирован вблизи ядерной мембраны. Матрикс митохондрий несколько просветлен, кристы однонаправлены, следствие чего является, по-видимому, накопление ионов кальция. Базальная часть клеточной плазмалеммы эпителия дистального канальца с множественными складками между которыми расположено большое количество крупных митохондрий с плотно упакованными и четко контурированными кристами. Видны вакуоли и вакуолеподобные образования с белковым аморфным содержимым.

Рис.2. Некроз и распад эпителиоцита проксимального канальца (Э). Цитоплазма соседней клетки повышенной электронной плотности. Ув. х1800.

К первому месяцу нарастают процессы декомпенсации. Это проявляется расширением просвета пространства между внешним и внутренним слоями капсулы с наличием белковых аморфных масс. Ядра подоцитов округло-овальной формы с преимущественно равномерным распределением хроматина по кариоплазме; наблюдается формирование не резко выраженных выпячиваний и инвагинаций. Просветы гемокапилляров расширены, видно увеличение количества и размеров фенестр в эндотелии капилляров. Базальная мембрана на отдельных участках неравномерно утолщена. Ядра эндотелиальных клеток с маргинальным расположением хроматина, неправильной формы. В цитоплазме видна хорошо развитая гранулярная ЭПС. В просвете капилляров – клетки крови. Отмечается неравномерное утолщение базальной мембраны на отдельных участках (рис.3).

Рис.3. Неравномерное утолщение базальной мембраны гемокапилляров клубочков. Со стороны ядер (Я) клеток, отмечается формирование выпячиваний и инвагинаций. В просвете полости клубочка видны аморфные белковые массы (АМ). Ув. х 6400.

К 2-му месяцу после алкоголизации процессы декомпенсации проявляются максимально. Просветы гемокапилляров расширены, видно увеличение количества и размеров фенестр в эндотелии капилляров. Со стороны ядер подоцитов отмечается формирование выпячиваний и инвагинаций, а также происходит резкое перераспределение хроматина за счет его преимущественной конденсации вблизи ядерной мембраны. Базальная мембрана на протяженных участках неравномерно утолщена. Выражена дистрофия эпителиоцитов проксимальных и дистальных канальцев.

Рис.4. В расширенном просвете гемокапилляра (Гк) видны эритроциты (Э). Отмечается снижение количества микроворсинок на апикальной поверхности клетки. Базальная мембрана (БМ) на отдельных участках неравномерно утолщена. Эн – эндотелиоцит, Я –ядро, КГ – комплекс Гольджи. Ув.х1800.

К третьему месяцу (рис.5) алкогольная нефропатия приобретает признаки хронического процесса. Цитоплазма отростков подоцитов с участками просветлений. Ядра мезангиальных клеток клубочков неправильной формы. В цитоплазме эпителиоцитов видны мелких выкуоли и вакуолеподобные образования. Базальная мембрана неравномерно утолщена.

Рис.5. В цитоплазме имеются крупные вакуоли (В) с компактным, слоистым содержимым (третичные лизосомы), а также видны расширенные канальцы гранулярной ЭПС. Ув.х1600.

Выводы
Таким образом, начальные проявления алкогольной нефропатии проявлются уже с первой недели алкоголизации и достигают максимального проявления ко 2-3-му месяцам. При этом резко замедляется процессы компенсаторной гипертрофии почки.

Литература:
1. Ажипа Я.И. К вопросу о состоянии оставшейся почки: Материалы II Закавказской конференции патофизиологов по защитно- приспособительным реакциям организма / Я.И. Ажипа; Ереван, 1962.-С. 39-42. -
2. Алиметова М.С. Компенсаторная гипертрофия почки после односторонней нефрэктомии у крыс и кроликов в раннем постнатальном периоде развития: Автореферат дисс. на соискание уч. степени канд. мед. наук / М.С. Алиметова; М., 1970.
3. Бонитенко Ю.Ю., Ливанов Г.А., Бонитенко Е.Ю., Колмансон М.Л. Острые отравления алкоголем и его суррогатами (пособие для врачей). – СПб.: Лань, 2000. – 107с.
4. Валентик Ю.В. К современной концепции алкоголизма и зависимости от алкоголя // Алкогольная болезнь. – 1998. – №2. – С. 1–4.
5. Маевская М.В. Патогенез алкогольной болезни печени и роль генетической предрасположенности в ее развитии // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. – 2004. – №5. – С. 2–10.  

9.14286
Ваша оценка: Нет Средняя: 9.1 (21 голос)

Ваге Мкртчян

Несомненно, работа интересная и имеет прикладное значение. Уважаемая Татьяна Павловна один вопрос: исследовали ли Вы ЦИК в крови как аутоимунный ответ организма на поражения базальных мембран?

Большое спасибо за интересный вопрос!

Глубокоуважаемый Ваге Карапетович, большое спасибо за Ваш вопрос. Мы не исследовали циркулирующие иммунные комплексы, поскольку асептическое воспаление, вызванное этанолом, изначально не имеет аутоиммунной или хронической инфекционной природы. В основе такого воспаления лежит, прежде всего, повреждение мембран клеток, причем не только базальных, также дополнительное повреждающее действие оказывают токсины за счет алкогольного поражения печени. Исследуя на световом, ультрамикроскопическом, гистохимическом уровнях клубочки нефрона, которые являются первоочередной "мишенью" ЦИК, мы обнаружили утолщения базальной мембраной клубочка за счет отложения под ней коллагеновых волокон без депозитов и каких-либо грубых нарушений структуры самой базальной мембраны, кроме того, выраженной пролиферации и инфильтрации клубочков практически на наблюдалось, как и слияния отростков подоцитов. Однако, вполне возможно, аутоиммунный компонент имеет место на более поздних сроках алкогольной интоксикации.

Уважаемая Татьяна

Уважаемая Татьяна Павловна, Спасибо за ответ, очень интересная статья и тема весьма актуальная.

Уважаемая Татьяна Павловна!

Уважаемая Татьяна Павловна! Спасибо большое за ответ. Еще один маленький вопросик: не исследовали ли Вы ультраструктуру надпочечников животных, "употреблявших" этанол?

Глубокоуважаемая Инесса Юрьевна,

Глубокоуважаемая Инесса Юрьевна, нет, мы не исследовали ультраструктуру надпочечников, т.к. это отдельная объемная работа. Наши коллеги из НМУ им. Богомольца проводили подобные исследования.

Несомненно, работа

Несомненно, работа представляет научный и практический интере. Однако, возник вопрос. В методике не указано удалялась ли почка у животных контрольной группы? Как Вы думаете, не связано ли отставание в весе подопытных животных и массе оставшейся почки по срокам наблюдения по сравнению с контролем со стрессом, испытанным ими во время нефрэктомии?

Спасибо за вопрос

Глубокоуважаемая Инесса Юрьевна , большое спасибо за вопросы и за интерес к нашей статье. В качестве контроля в этом случае мы использовали интактных животных, у которых почка не удалялась. Как Вы абсолютно правильно заметили, отставание в массе тела тела и нарастание массы оставшейся почки безусловно связано со стрессом, поскольку нефрэктомия - довольно травматичная операция, что сопровождается кровопотерей. По данным литературы при отсутствии дополнительных стрессоров пластические процессы после подобной операции преобладают уже к концу первой недели. Однако роль этанола как ростоингибирующего фактора тоже нельзя отрицать, о чем свидетельствуют данные ультрамикроскопии.

Работа интересная и имеет

Работа интересная и имеет практическое значение.

Лариса Улько

Большое спасибо!

Глубокоуважаемая Лариса Григорьевна, благодарим за высокую оценку нашего научного труда.
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.