facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Wiki
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip

СПЕЦИФИКА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ВНОВЬ СИНТЕЗИРОВАННОГО ДЕРИВАТА ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ АНТИКОАГУЛЯНТНОГО ДЕЙСТВИЯ

Автор Доклада: 
Карагезян К.Г., Топузян В.О., Овакимян С.С.
Награда: 
СПЕЦИФИКА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ВНОВЬ СИНТЕЗИРОВАННОГО ДЕРИВАТА ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ АНТИКОАГУЛЯНТНОГО ДЕЙСТВИЯ

СПЕЦИФИКА ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ВНОВЬ СИНТЕЗИРОВАННОГО ДЕРИВАТА ГАММА-АМИНОМАСЛЯНОЙ КИСЛОТЫ АНТИКОАГУЛЯНТНОГО ДЕЙСТВИЯ

Константин Григорьевич Карагезян, д-р биол. наук, проф., акад.
В.О. Топузян, С.С. Овакимян
Научно-технологический Центр органической и фармацевтической химии Национальной Академии Наук республики Армения

 

Our data obtained in vitro have shown that synthetic preparation of H-29, which is a derivate of gamma-amminabutiric acid (N-benzoyl-O-isopropyl, -dehidrotirosyl-gamma-aminobutiric acid) demonstrates the high level of antitromboplastic activity in the brain, kidney, liver, miocardial tissues, as well as in the blood corpuscles. The results of this investigations have not only an extremely high significance of academician interest, but also they have a serious practical applications.

Установленный впервые в 1951 г. К.Г. Карагезяном факт условно-рефлекторной регуляции свертывания крови [1] послужил основанием к раскрытию плеяды активаторов и ингибиторов этого процесса из серии непризнанных классическими ингредиентов этой системы [2-4]. Отмеченное касается различных категорий фосфолипидов (ФЛ) нейтральной и кислой природы, обусловливающих функциональную активность определенных ферментных систем, катализирующих и ингибирующих течение процесса гемокоагуляции [5-8]. В связи с указанным особый интерес представляют состояния, сопровождающиеся развитием расстройств в свертывающей системе крови, характеризующихся внутрисосудистым тромбообразованием, основательно изученным школой академика Г.Х. Бунятяна [9,10] с акцентированием при этом определенных звеньев адреналовой системы, главным образом надпочечных желез, наиболее активирующихся под действием гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), характеризующейся многопрофильностью развиваемых ею эффектов. В подобной постановке вопроса выявление и изучение особенностей действия вновь синтезированного доктором химических наук В.О. Топузяном производного ГАМК (N-бензоил-О-изопропил, 

-дегиротирозил-ГАМК) под кодовым названием Н-29 на свертывающую систему крови представляет не только существенный академический интерес, но имеет также важное прикладное значение.

Учитывая вышеизложенное и имеющийся у нас опыт изучения регуляторных механизмов реакций тканевого метаболизма, в частности различных звеньев обмена ФЛ в том числе и процессов гемокоагуляции с участием ГАМК [11] при особом акцентировании изменений активности фосфолипазы А2, катализирующей процесс деацилирования ФЛ-глицеридов, мы задались целью проследить за динамикой сдвигов тромбопластической активности (ТА), являющейся ФЛ-зависимым компонентом системы гемокоагуляции. На основании наших ранее проведенных исследований была конкретизирована активирующая роль фосфатидилхолинов (ФХ), фосфатидилэтаноламинов (ФЭ), сфингомиелинов (СФМ) и особенно лизофосфатидилхолинов (ЛФХ), являющихся продуктом деацилирования ФХ, сопровождающимся одновременным освобождением жирных кислот (ЖК) полиенового ряда. Однозначность участия указанного липидного комплекса в свертывающей системе крови очевидна в качестве мощных стимуляторов ТА. В связи с отмеченным подчеркивается опосредованное регуляторное воздействие ГАМК на процесс гемокоагуляции при активной мобилизации, как уже отмечалось, определенных звеньев адреналовой системы. Этим в частности объясняется стимулирующая роль ФЭ в формировании специфических ферментных систем, выступающих в качестве активаторов и ингибиторов определенных этапов процесса свертывания крови. Логическим развитием этих исследований явилось установление факта присутствия указанных выше ФЛ-глицеридов преимущественно холинсодержащих в составе фибриногена крови, являющегося иницирующим тромбообразующим началом гемокоагуляционного процесса в физиологически функционирующем организме и индуктором внутрисосудистого тромбообразования при различных болезненных состояниях [12,13].

Исходя из вышеизложенного цель и задачи настоящего исследования были конкретизированы с учетом первостепенности выявления природы регуляторных механизмов, ответственных за обеспечение норм клеточной активности в частности физиологического статуса системы гемокоагуляции, интенсивно регулируемой одним из ее главных составляющих ТА.

Схема проведения эксперимента состояла в предварительном измельчении исследованных тканей и суспендировании по 1 г навески каждой из них в 2-х мл инкубационной среды в трех параллельных определениях в присутствии 0,1, 0,3 и 0,5 мл активного начала (Н-29) в каждом из них в отдельности. По завершении последующего 2-х часового инкубирования полученной смеси с соблюдением отмеченных условий эксперимента и проведенного центрифугирования образовавшиеся осадки исследованных тканей использовали на предмет определения в них динамики изменений ТА. В подобной постановке вопроса в качестве объектов исследования были отобраны цельная кровь, мозговая, печеночная, миокардиальная и почечная ткани экспериментальных белых крыс массой 180-200 г, содержавшихся в стандартных условиях вивария и голодавших в течении 12 ч перед их умерщвлением методом декапитирования под легким эфирным наркозом. Последнему предшествовало взятие у экспериментальных животных проб крови после предварительной крестообразной фиксации их на станках для мелких животных. Это производилось проколом шприцом венозного узла в месте слияния подключичной и верхней полой вен по биссектрисе угла, образуемого между торсом и фиксированной передней лапой при объемных соотношениях между заранее набранным в шприц стабилизатором (оксалат натрия) и кровью 1:9. Определение протромбинового времени проводили по Квику в модификации Кудряшова [14], ТА – по Кудряшову, времени свертывания крови – по Ли Уайту [15]. Определение ТА в форменных элементах крови, отделяемых известными методами центрифугирования, и в срезах исследованных тканей после предварительного их декапсулирования и освобождения от кровеносных сосудов производили до (контроль) и после их двухчасовой инкубации в 2 мл системы трис-HCL буфера при Т=370C и рН = 7,4 в присутствии различных концентраций (0,1, 0,3 и 0,5 мл) 0,01 М раствора препарата Н-29.

Согласно результатам проведенных исследований, отраженным в таблице, наиболее высокий уровень ТА в контроле обнаруживается в мозговой и почечной тканях, а также в форменных элементах крови. В то же время в печеночной и тем более в миокардиальной тканях практически интактных животных ТА оказывается слабее в 2 и более раза.

Таблица
Особенности ингибирующего действия различных концентраций синтетического препарата H-29 на тромбопластическую активность тканевых систем и форменных элементов крови белых крыс in vitro

Объект исследования

Тромбопластическая активность в сек протромбинового времени при 2-х часовой инкубации в системе трис-HCL буфера

К

1

% разницы от К

2

% разницы от К

3

% разницы от К

Мозг

15 ± 0,21

21 ± 0,23

-40

23 ± 0,22

-53

26 ± 0,25

-73

Почки

15 ± 0,23

16 ± 0,21

-7

17 ± 0,23

-13

21 ± 0,21

-40

Форменные элементы крови

16 ± 0,21

26 ± 0,23

-63

38 ± 0,25

-138

52 ± 0,31

-225

Печень

30 ± 0,19

80 ± 0,29

-167

82 ± 0,28

-173

100 ± 0,31

-233

Миокард

35 ± 0,20

42 ± 0,27

-20

44 ± 0,25

-26

58 ± 0,27

-66

Примечания: n = 25; К – контроль; 1, 2, 3 – добавленные к буферной среде соответственно приведенной нумерации 0,1 , 0,3 , 0,5 мл 0,01 М р-ра препарата Н-29; обозначения « - » указывают на степень падения тромбопластической активности от нормы в %.

Как явствует из данных приведенных в таблице, ингибирующее действие препарата Н-29 на ТА исследованных биологических объектов развивается адекватно возрастанию его концентрации в инкубационной среде (0,1-0,5 мл) согласно ниже приведенной очередности: печень → миокард → форменные элементы крови → мозг → почки. Примечательно при этом особо выраженное падение ТА в печеночной ткани и форменных элементах крови. В первой из них после 2-х часовой инкубации в системе трис-HCL буфера указанный сдвиг по сравнению с величиной ТА в контроле развивается в соответствии с примененным объемом (0,1, 0,3 и 0,5 мл) введенного в инкубационную среду препарата Н-29, на 167, 173 и 233 % соответственно. Что касается динамики падения ТА форменных элементов крови в однотипных условиях эксперимента, то указанный сдвиг фиксируется в них в пределах 63, 138 и 225 %. Установленный факт заслуживает особого внимания, поскольку, согласно издавна сформировавшемуся определению функциональная универсальность печеночной ткани как своеобразной «лаборатории» физиологически метаболизирующего организма заключается и в приобщении к многочисленным биосинтетическим процессам, касающимся факторов системы свертывания крови. Это в частности касается и тромбопластинов, выступающих в миссии основных составляющих фермента тромбокиназы, катализирующей процесс трансформации инактивного протромбина в активный тромбин. Аналогичные суждения правомерны в различной степени их акцентирования и в отношении отдельных представителей элементов крови, преимущественно тромбоцитов как основного депо тромбопластинов и важней­шего физиологически активного соединения серотонина одного из су­щественных регуляторов процесса гемокоагуляции.

Установленное нами ингибирующее действие препарата Н-29 на ТА служит основанием к обстоятельному изучению особенностей биохими­ческих и молекулярно-биологических механизмов подключения много­численных факторов в том числе липидной природы в реализацию различных этапов формирования процесса гемокоагуляции. Полученные результаты как объективно существующая реальность служат серьезным основанием рекомендовать препарат Н-29 к до- и клиническому испытанию при различных осложнениях процесса свертывания крови как одного из основных патогенетических показателей в условиях внутрисосудистого тромбообразования при различных болезненных состояниях ЦНС и сер­дечно-сосудистого аппарата.

Литература:

  1. Карагезян К.Г. Условно-рефлекторная регуляция свертывания крови. Дис..... канд. биол. наук. Ереван. 1953. 310 С.
  2. Карагезян К.Г. // ДАН СССР. 1958. Т.118, N1. С.142-145.
  3. Карагезян К.Г. // Фосфолипиды головного мозга, цереброспинальной жидкости, крови и печени при различных функциональных состояниях организма. Дис..... доктора биол. наук. Ереван. 1968. 463 С.
  4. Бунятян Г.Х., Карагезян К.Г. // ДАН СССР. 1954. Т.99, N5. С.831-834.
  5. Карагезян К.Г., Амирханян О.М. // ДАН СССР. 1971. Т.201, N1. С.238-241.
  6. Карагезян К.Г., Овакимян С.С., Тевосянц А.В. // ДАН СССР. 1971. Т.201, N2. С.486-489.
  7. Карагезян К.Г., Овакимян С.С., Тевосянц А.В. // ДАН СССР. 1971. Т.201, N3. С.733-736.
  8. Карагезян К.Г., Казарян П.А. // ДАН СССР. 1974. Т.215, N1. С.221-223.
  9. Бунятян Г.Х., Казарян Б.А., Карагезян К.Г., Гулян Э.А. // Доклады АН Арм. ССР. 1965. Т.II, N5. С.289-295.
  10. Buniatian H.Ch. Studies of the Role of Gamma-Amminobutyric Acid in Carbohydrates Metobolism. Yerevan. 1961. 67 P.
  11. Карагезян К.Г. // Доклады АН Арм. ССР. 1968. Т.VIII, N1. С.3-10.
  12. Овакимян С.С. Фосфолипиды фибриногена и изменения их содержания в процессе фибринообразования. Дис..... канд. биол. наук. Ереван. 1970. 195 С.
  13. Карагезян К.Г., Саакян С.С. Вопр. биохимии мозга. Ереван. 1964. N1. С.163-165.
  14. Предтеченский Б.Е. Лабораторные методы исследования. Москва. 1950. С.113-115.
  15. Андреенко Г.В. Пробл. гематол. и перелив. крови. Москва. 1962. N9. С.31-33.
5
Ваша оценка: Нет Средняя: 5 (1 голос)
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.