facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Wiki
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ГЛУБИНЫ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ФОСФОЛИПИДОВ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ И ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ РАЗВИТИЯ ОСТРОГО ТУБЕРКУЛЕЗНОГО ВОСПАЛЕНИЯ ЛЕГКИХ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И ЭФФЕКТЫ ПРЕПАРАТА “ЗЕТАПОЛ” НА ЭТОМ ФОНЕ

Автор Доклада: 
Карагезян К.Г., Сафарян М.Д,, Овакимян С.С., Арутюнян Д.А.
Награда: 
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ГЛУБИНЫ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ФОСФОЛИПИДОВ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ И ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ РАЗВИТИЯ ОСТРОГО ТУБЕРКУЛЕЗНОГО ВОСПАЛЕНИЯ ЛЕГКИХ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И ЭФФЕКТЫ ПРЕПАРАТА “ЗЕТАПОЛ” НА ЭТОМ ФОНЕ

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ГЛУБИНЫ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ ФОСФОЛИПИДОВ В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ И ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ РАЗВИТИЯ ОСТРОГО ТУБЕРКУЛЕЗНОГО ВОСПАЛЕНИЯ ЛЕГКИХ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ И ЭФФЕКТЫ ПРЕПАРАТА “ЗЕТАПОЛ” НА ЭТОМ ФОНЕ

Константин Григорьевич Карагезян1, д-р биол. наук, проф., акад.,
М.Д.Сафарян2, С.С.Овакимян1, Д.А.Арутюнян1,
1Научно-технологический Центр органической и фармацевтической химии Национальной Академии Наук Республики Армения
2Республиканский антитуберкулезий диспансер Министерства здравоохранения Республики Армения

 

Our data obtained have shown that experimental tuberculosis of lungs of guinea pigs is characterized by significant abnormalities of phospholipids composition especially of lysophosphatidylcholines in blood erythrocyte and lymphocyte membranes.
Using of superlow concentrations of the Ca2+- ds - RNA is accompanied by normalization of qualitative-quantitative disorders of all categories of phospholipids except lysophosphatidylcholines, the high level of which remained unchanged.

Необходимость разработки принципиально новых подходов по изысканию современных наиболее совершенных и результативных средств антитуберкулезного действия является проблемой первостепенной важности. В подобной постановке вопроса особого внимания заслуживает развиваемая в последнее время концепция профессора Е.Б.Бурлаковой [1] об исключительно высокой терапевтической эффективности сверхмалых доз факторов химической природы в том числе физиологически активных соединений и лекарственных препаратов, колеблющихся в пределах более чем 10-18 М, а также физических факторов сверхнизкой интенсивности.

С отмеченной точки зрения особого внимания заслуживает препарат под кодовым названием “зетапол”, являющийся кальциевым преципитатом дрожжевой низкомолекулярной двуспиральной рибонуклеинивой кислоты (Са2+- дс - РНК). Результаты многочисленных исследований по выявлению и изучению в деталях особенностей физико-химических свойств этого весьма яркого физиологически активного соединения, способствующего установлению уникальных по существу, антивирусных, антибактериальных, репарационных, противораневых, интерферониндуцирующих, гемопоэзактивирующих, антиотечных [2-7] свойств препарата. Высокая степень противотуберкулезного действия дс-РНК была продемонстрирована нами ранее на солидном по объемку клинико-экспериментальном материале с положительной оценкой Гос.Ком.СССР по делам изобретений и открытий N206-КМ от 11.08.1986 г., авторскими свидетельствами Гос.Реестра СССР N1367197 от 15.09.1987 г. и N1374494 от 15.10.1987 г., N13462456, А61В17/00 1996 г.; патентом ВНИИ Гос. патентной экспертизы ВНИИГПЭ Гос. Патентного ведомства СССР от 25.10.1990 г.; Патентным управлением РА, патент N 1072 от 17.07.1998 г., а также Минздравом АрмССР от 16.03.1992.

В развитие ранее проведенных исследований по изучению антитуберкулезного действия дс-РНК, формировалась основная цель настоящего исследования, состоявшаяся в выявлении эффективности действия ее калциевого преципитата- Са2+- дс - РНК в сверхнизких концентрациях (10-12М) на расстроенные звенья метаболизма фосфолипидов (ФЛ) в мембранах эритроцитов (МЭ) и лимфоцитов (МЛ) крови при остром туберкулезном поражении легочной ткани экспериментальных морских свинок.

Включение МЭ и МЛ в настоящее исследование было обусловлено укоренившимся в последнее время в научной литературе мнением об универсальности МЭ, отражающих в целом структурно-функциональные и метаболические особенности мембранных образований клеток различных уровней их филогенетической дифференциации. Вместе с тем МЭ и особенно МЛ отводится специальная роль в инициации, формировании и стабилизации иммунологических процессов [8-11]. Вышеотмеченное возбуждает живой интерес к проведению широкомасштабных исследований в направлении изучения и выявления особенностей качественно-количественных сдвигов ФЛ как основных структурно-функциональных компонентов живых мембран в норме и особенно при экстремальных состояниях организма, в том числе его туберкулезном поражении.

Исследования проводили на 25-и морских свинках двухмесячного возраста массой 250-300 г, зараженных культурой МБТ штамма Н37 в дозе 0,0001 мг путем подкожной инъекции в паховую область. Кровь для исследования брали спустя 5, 10, 15 и 30 дней из додхвостовой вены шприцом. Получение ацетоновых порошков осуществляли в среде 0,27 М сахарозы и 0,1 мМ ЭДТА (1:1). МЭ выделяли по Лимберу [12]. Лимфоциты отделяли центрифугированием клеточной суспензии в градиенте плотности фикол-400 – верографин 12 и инкубировали в 107 мл в 0,01 М р-ра трис-НСI буфера при 370С, pH 7,4 в смеси со средой 199 (в соотношении 1:4) в присутствии митогена конканавалина А (6 мкг/мл). МЛ, освобождавшиеся после осмотического шока, осаждали повторным центрифугированием с использованием их для количественного определения ФЛ [13].

Экстракцию ФЛ осуществляли по Фолчу [13] в модификации Карагезяна [14], фракционирование их индивидуальных представителей – методом одномерной восходящей хроматографии в тонком слое силикагеля с использованием системы растворителей: хлороформ – метанол – аммиак в объемных соотношениях 65:35:5.

Согласно полученным данным, нейтральная категория ФЛ (НФЛ) в МЭ и МЛ представлена сфингомиелинами (СФМ), фосфатидилхолинами (ФХ), лизофосфатидилхолинами (ЛФХ) и фосфатидилэтаноламинами (ФЭ), а кислая (КФЛ) - монофосфоинозитидами (МФИ), фосфатидилсеринами (ФС), фосфатидными кислотами (ФК) и кардиолипинами (К).

По результатам проведенных исследований, приведенным в табл.1 и 2, при туберкулезном воспалении легочной ткани в МЭ и МЛ крови морских свинок бросается в глаза статистически достоверное нарушение филогенетически стабилизированного постоянства в картине ФЛ-ФЛ соотношений изученных биологических систем организма.

туберкулез таблица

туберкулез таблица

В основе отмеченных отклонений фигурируют патологически развиваемые межфракционные взаимопревращения ФЛ, в известной степени вызываемые сильно выраженным многократным возрастанием в МЭ и МЛ содержания ЛФХ. В связи с отмеченным наиболее реальным, на наш взгляд, объяснением следует признать альтернативный механизм образования столь высоких концентраций ЛФХ. Наряду с известным путем деацилирования ФХ, не исключено подключение и обратного пути - процесса реацилирования глицерил-фосфорил-холина при активном участии различных жирных кислот, приводящем к ресинтезу ЛФХ в достаточно высоких концентрациях как необходимое условие в стимуляции определенных этапов компенсаторно-приспособительных реакций, чрезвычайно важных в реализации иммуномодулирующей активности организма особенно в условиях патологии и в частности при изученном болезненном состоянии организма. Высказанные соображения созвучны современным суждениям о роли лизо-ФЛ в том числе и ЛФХ в биологии и патологической физиологии [15]. Они, как отмечалось, в основном касаются участия этих соединений в формировании механизмов стимуляции иммунологической активности организма. Одним из частных показателей падения последней при данном болезненном состоянии является и неоднократно наблюдавшееся резкое уменьшение содержания СФМ в исследованных мембранах как соединений, рассматриваемых в настоящее время в качестве факторов, причастных в определенной степени к механизмам становления, развития и стабилизации физиологического статуса организменного иммунитета [8-11].

Установленное нами ярко выраженное количественное возрастание КФЛ – ФС, ФК и К в МЭ и МЛ является свидетельством мобилизованности компенсаторных механизмов, ответственных за максимальное поддержание резко подавленного энергетического потенциала на общеорганизменном уровне.

Согласно результатам, отраженным в табл. 3 и 4, становится очевидным коррегирующее действие Са2+- дс - РНК на расстроенные звенья метаболизма ФЛ. Последнее выражается в восстановлении филогенетически стабилизированного постоянства качественно-количественного состава ФЛ различных категорий и ФЛ-ФЛ соотношений в биологических системах организма.

Особый интерес представляет понижение величины коэффициента (К) отношения суммы НФЛ к сумме КФЛ ( К СНФЛ/СКФЛ), обусловленное возрастанием “удельного веса” КФЛ в сумме всех ФЛ (СФЛ) как соединений, наделенных высоким потенциалом функциональной активности, в частности в реакциях респираторной функции на клеточном уровне в роли мощных активаторов дыхательного процесса.

Таблица 3.

Показатели

К

ТБС

30-ый день

%-раз-

ницы

от К

ТБС

Ca2+-дс-РНК

%-раз-

ницы

от К

Лизофосфатидилхолины

17,5±0,6

92,1±0,7*

+426,3

32,9±0,5*

+88,0

Монофосфоинозитиды

31,4±0,7

75,5±0,7*

+140,0

35,1±0,6*

+12,0

Сфингомиелины

19,3±0,8

10,0±0,5*

-48,2

18,9±0,7*

-2,1

Фосфатидилхолины

79,8±0,9

46,0±0,7*

-42,4

77,9±1,0***

-2,4

Фосфатидилэтаноламины

37,6±0,7

27,8±0,5*

-26,1

34,9±0,7***

-7,2

Фосфатидилсерины

16,8±0,7

8,2±0,5*

-51,2

16,1±0,6***

-4,2

Фосфатидные кислоты

13,0±0,7

21,2±0,6*

+63,0

12,2±0,7***

-6,2

Кардиолипины

17,8±0,6

29,8±0,7*

+67,4

16,9±0,6***

-5,1

С НФЛ

154,2±1,0

175,9±1,0*

+14,1

164,6±1,0*

+6,7

С КФЛ

79,0±0,8

134,7±0,8*

+70,5

80,3±0,8***

+1,6

С ФЛ

233,2±1,1

310,6±1,1*

+33,2

244,9±1,0*

+5,0

К С НФЛ / С КФЛ

2,0

1,3

 

2,0

 

Коррегирующее действие сверхнизких концентраций (10-12М) Ca2+-дс-РНК на нарушенные стороны спектра фосфолипидов в мембранах эритроцитов морских свинок с 30 - дневным острым экспериментальным туберкулезом легких

Примечания: n=30 (по 10 животных в каждой опытной группе); введение раствора Ca2+-дс-РНК в объеме 1 мл производилось ежедневно на протяжении 10 дней; обозначения достоверности полученных результатов те же, что и в табл.1.

Таблица 4.
Коррегирующее действие сверхнизких концентраций (10-12М) Ca2+-дс-РНК на нарушенные стороны спектра фосфолипидов в мембранах лимфоцитов морских свинок с 30 - дневным острым экспериментальным туберкулезом легких

Показатели

К

ТБС

30-ый день

%-раз-

ницы

от К

ТБС

Ca2+-дс-РНК

%-раз-

ницы

от К

Лизофосфатидилхолины

16,3±0,6

96,0±0,9*

+576,0

30,9±0,6*

+89,6

Монофосфоинозитиды

27,0±0,8

52,2±0,9*

+93,0

25,3±0,8***

-6,3

Сфингомиелины

26,2±0,9

13,4±0,9*

-49,0

25,9±0,9***

-1,1

Фосфатидилхолины

79,0±1,0

37,3±1,1*

-52,8

77,3±1,1***

-2,2

Фосфатидилэтаноламины

46,0±0,8

29,2±0, 8*

-36,5

44,8±0, 7***

-2,6

Фосфатидилсерины

42,4±0,9

61,6±0,7*

+45,3

40,3±0,9***

-5,0

Фосфатидные кислоты

12,0±0,8

27,6±0,8*

+130,0

13,1±0,8***

+9,2

Кардиолипины

16,8±0,9

28,3±0,8*

+68,5

15,7±0,9***

-6,5

С НФЛ

167,5±1,0

175,9±1,0*

+5,0

178,9±1,0*

+6,8

С КФЛ

98,2±0,9

169,7±0,9*

+72,8

94,4±0,9**

-3,9

С ФЛ

265,7±1,0

345,6±1,0*

+30,0

273,3±1,0***

+2,9

К С НФЛ / С КФЛ

1,7

1,0

 

1,9

 

Примечания: n=30 (по 10 животных в каждой опытной группе); введение раствора Ca2+-дс-РНК в объеме 1 мл производилось ежедневно на протяжении 10 дней; обозначения достоверности полученных результатов те же, что и в табл.1.

Литература:

  1. Бурлакова Е.Б. // Вестник РАН, 1994, Т. 64, N 5, С. 425-431.
  2. Агабалян А.С., Давтян О.Я., Багдасарян А.А., Манукян Ж.В., Мартиросян В.С., Рухкян Л.А., Захарян Р.А. // Докл. НАН РА, Ереван, 1989, Т. 88, N 1, С. 31-34.
  3. Агабалян А.С., Рухкян Л.А., Захарян Р.А. // Докл. НАН РА, Ереван, 1989, Т. 88, N 2, С. 93-96.
  4. Агабалян А.С., Назаров Л.У., Базиян А.Р., Акопян Э.Б., Багдасарян А.А., Геворкян Г.А., Чухаджян Г.А., Захарян Р.А. // Докл. НАН РА, Ереван, 1993, Т. 94, N 3, С. 173-177.
  5. Агабалян А.С., Агавелян А.М., Давтян О.Я., Макарян А.П., Акопян А.С., Карагезян К.Г. // Докл. НАН РА, Ереван, 1997, Т. 98, N 2, С. 166-169.
  6. Агабалян А.С., Туманян М.А., Захарян Р.А. // Докл. НАН РА, Ереван, 1998, Т. 98, N 4, С. 363-365.
  7. Агабалян А.С., Агавелян А.М., Казарян А.В. // Сб. Научных трудов, посв. 70-летию ЕрГМУ, Ереван, 2000, С. 59-61.
  8. Бергельсон Л.Д., Дятлoвицкая Э.В. // Итоги науки и техники. Серия “Иммунология”, М. ВИНИТИ, 1988, Т. 22, С. 6-21.
  9. Дятлoвицкая Э.В. // Биохимия, 1991, Т. 56, N 4, С. 560-564.
  10. Дятлoвицкая Э.В. // Биохимия, 1995, Т. 60, N 6, С. 843-850.
  11. Дятлoвицкая Э.В. Андреасян Г.О., Малых Я.Н., Рылов С.Н. // Биохимия, 1997, Т. 62, N 4, С. 651-656.
  12. Limber G.R., Davie R.F., Haker A.M.S. // Blood, 1970, v. 36, N 2, p. 111-118.
  13. Folch J., Lees M., Sloane-Stane G. // J. Biol. Chem., 1957, v. 226, p. 497-509.
  14. Карагезян К.Г. // В кн.: Фосфолипиды и их роль в жизнедеятельности организма, Ереван, Айастан, 1972, 267 с.
  15. Goetzl E.E.J., Lunch K.R. Lysophospholipids and Eicosanoids in biology and pathophysiology // Annals of the New-York Acad. of sci., 2000, v. 905, 357 p.
5
Ваша оценка: Нет Средняя: 5 (1 голос)
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.