facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Wiki
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip

РОЛЬ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНЫХ КЛЕТОК ПОЧКИ В ФИБРОГЕНЕЗЕ

Автор Доклада: 
Лазарев К. Л., Сатаева Т. П.
Награда: 
РОЛЬ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНЫХ КЛЕТОК ПОЧКИ В ФИБРОГЕНЕЗЕ

УДК:615+591.461:57.015

РОЛЬ ИНТЕРСТИЦИАЛЬНЫХ КЛЕТОК ПОЧКИ В ФИБРОГЕНЕЗЕ

Лазарев Константин Леонидович, д-р мед. наук, проф.
 Сатаева Татьяна Павловна, аспирант

Крымский государственный медицинский университет им. С.И. Георгиевского


Авторы акцентируют внимание на том, что возникающее при хронической алкогольной интоксикации развитие интерстициального фиброгенеза резко ухудшает прогноз заболевания. Поэтому особое значение приобретают исследования, направленные на понимание механизмов его развития и возможностей ограничения фиброгенеза: уменьшение клеточной реакции, угнетение пролиферации и активации фибробластов, снижение синтеза и стимуляция деградации экстрацеллюлярного матрикса и снижения образования коллагена.
Ключевые слова: интерстиций, алкоголь, почка, нефрэктомия.

Induced by alcohol renal fibrosis is the progressive course of renal function going from normal to damaged, to destroyed, and at last to lose its function. It is a physiopathologic change. Thus caused renal inherent cells get damaged. there is a lot of deposits and accumulations of collagen that cause renal parenchyma sclerosis and to form cicatrices gradually, and at last make kidney lose it's function completely. Renal fibrosis is characterized by the excrescent deposition of the cell. The six basic renal inherent cells are the glomerular capillary endothelial cells, the glomerular capillary epithelial cells, the glomerular mesangial cells, the renal tubular epithelial cells, and the renal interstitial fibroblasts and macrophages.
Key words: interstitium, alcohol, kidney, nephrectomy.

Клеточно-молекулярные механизмы фиброзной трансформации тубулоинтерстициальной ткани широко изучаются во всем мире, но многие вопросы до сих пор остаются не решенными. Одной из основных проблем современной нефрологии является изучение механизмов прогрессирования заболеваний почек с развитием в конечном итоге хронической почечной недостаточности. Известно, что снижение уровня клубочковой фильтрации коррелирует главным образом со степенью тубулоинтерстициальных, а не клубочковых повреждений, и большинство изменений, определяющих исход заболеваний почек, происходит именно в почечном интерстиции [1,2,6]. Позже несколькими исследователями с использованием многофакторного анализа при изучении различных экспериментальных моделей тубулоинтерстициального фиброза было доказано, что именно выраженность диффузных тубулоинтерстициальных изменений определяет резистентность к патогенетической терапии и ускоренное прогрессирование почечной недостаточности как при гломерулопатиях, так и при токсических поражениях почек [4,5,7].

Целью данной работы было изучение морфологических изменений интерстициальных клеток почки и их роли в фиброгенезе в условиях моделирования алкогольной интоксикации.

Материал и методы исследования
Исследование выполнено на белых беспородных крысах половозрелого возраста, которые содержались в стандартных условиях вивария. Нефрэктомия (НЭК) выполнялась под эфирной анастезией. После обработки антисептиком кожных покровов производилась срединная лапаротомия. Из забрюшинного пространства в рану выводиласть левая почка, и после первязки образований почечной ножки производилась нефрэктомия. Рана послойно ушивалась, место разреза обрабатывалось антисептиком. Экспериментальные животные ежедневно в течение 90 суток получали раствор 40% этанола из расчета 10 мл/кг массы тела, который с помощью зонда вводили внутрижелудочно. Содержание и манипуляции с животными проводились в соответствии с положениями биолэтики. Через 60 суток опыта животных выводили из эксперимента путем декапитации под эфирным наркозом и сразу изымали почки. Обработка материала для электронномикроскопического исследования осуществлялась по общепринятой методике. В качестве первичных использовались моноклональные антитела к CD68, виментину и   Для каждого маркера выполнялись контрольные исследования с целью исключения ложнопозитивных или ложнонегативных результатов.

Результаты и обсуждение
Морфологические изменения тубулоинтерстициальной ткани при алкогольной интоксикации представляют собой различной степени повреждения эпителия, базальной мембраны канальцев, кровеносных и лимфатических сосудов и изменений в почечном интерстиции в виде клеточных инфильтратов (рис.1) и склероза (рис. 2). Интерстициальный инфильтрат в этом случае представлен моноцитами и/или макрофагами и лимфоцитами, в основном Т-лимфоцитами. Лишь небольшое количество макрофагов в интерстициальном инфильтрате может происходить из резидентных макрофагов вследствие их пролиферации in situ, подавляющее же большинство клеток мигрирует в интерстициальное пространство из перитубулярных капилляров.

Тубулоинтерсициальные изменения почек при алкогольной нефропатии

Рис. 1. Тубулоинтерсициальные изменения почек при алкогольной нефропатии, представленные воспалительной инфильтрацией стромы. Гематоксилин и эозин. Ув.: ок.10 х об.40.

Тубулоинтерсициальные изменения почек при алкогольной нефропатии

Рис. 2. Тубулоинтерсициальные изменения почек при алкогольной нефропатии, представленные фиброзом стромы.Окраска по Маллори. Ув.: ок.10 х об.40.

При этом эндотелий перитубулярных капилляров играет важную роль в процессе формирования интерстициального инфильтрата. В очаге воспаления подтип М1 макрофагов является ключевыми клетками дальнейшего повреждения через генерацию большого количества кислородных радикалов и липидных медиаторов, вызывающих локальное повреждение, главным образом благодаря тому, что служат источником цитокинов и факторов роста: интерлейкина-1b (ИЛ-1b), фактора некроза опухоли-a (ФНО-a), трансформирующего фактора роста-b (ТФР-b), фактора роста фибробластов (ФРФ), эпителиального фактора роста (ЭФР) и тромбоцитарного фактора роста (ТцФР).

Под влиянием таких медиаторов, как ТФР-b, ТцФР происходит привлечение в интерстициальную ткань фибробластов. Эти клетки, достигнув места воспаления, пролиферируют, секретируют экстрацеллюлярные матричные белки (рис.3) и могут изменить свой фенотип (подобно миофибробластам), что также происходит под влияние цитокинов (ТФР-b, GM-CSF) [3]. Активированные фибробласты отличаются высокой пролиферативной и синтетической активностью, для них также характерно усиление экспрессии ингибиторов протеаз, предотвращающих разрушение матриксных белков. При интенсивном фиброгенезе увеличение количества фибробластов сопровождается их преобразованием в матрикспроизводящий фенотип миофибробласта (рис.4).

Позитивная экспрессия виментина клетками интерстиция

Рис. 3. Позитивная экспрессия виментина клетками интерстиция, имеющими мезенхимальное происхождение. Ув.:ок.10 х об.40.

Позитивная экспрессия

Рис. 4. Позитивная экспрессия -SMA миофибробластами.Ув.:ок.10 х об.100.

Повреждение канальцевых клеток вносит умеренный вклад в продукцию матрикса миофибробластами. Здоровые почки лишены миофибробластов, только единичные клетки предшественники фибробластов могут быть найдены в интерстициальном пространстве.  Имеющиеся в настоящее время доказательства дают возможность предполагать по крайней мере, четыре возможных источника этих клеток: активированные пролиферирующие резидентные интерстициальные фибробласты, перемещенные периваскулярные клетки, циркулирующие мезенхимальные клетки и трансдифференцированные канальцевые эпителиоциты.

Под влиянием длительного действия 40% этанола определяются значительные изменения в мезангии сосудистого клубочка нефрона. Мезангиальные клетки имеют структурные признаки повышенной функциональной активности. В этих клетках определяются большие по размерам ядра, кариолемма которых образует многочисленные глубокие инвагинации. Ядра электронноплотные, гетерохроматин в виде различных по размеру глыбок концентрируется возле внутреннего листка кариолеммы. В ядре расположено крупное электронноплотное ядрышко. Цитоплазма мезангиальных клеток повышенной электронной плотности. В цитоплазме определяется значительное количество рибосом, полисом, волокнистоподобных структур. Многочисленные митохондрии овальной или удлиненной формы с хорошо развитыми кристами. Наибольшей толщины гломерулярной базальная мембрана достигает в участках размещения мезангиальных клеток (рис.5).

Нефрэктомия с алкоголизацией 40%

Рис.5. Нефрэктомия с алкоголизацией 40% этанолом сроком 3 мес. Утолщение базальной мембраны. Ув. х 4000

По данным имуногистохимического исследования доминируют мезангиальные клетки гладкомышечного типа (позитивная эксперссия гладкомышечного актина), принимающих участие в регуляции клубочковой фильтрации благодаря способности сокращаться (рис.6). При сокращении мезангиальных клеток уменьшается площадь поверхности стенки капилляров, через которую происходит фильтрация и таким образом, снижается уровень ультрафильтрации. Таким образом, мезангиальные клетки принимают участие в регуляции клубочковой фильтрации благодаря способности к сокращению. 

Позитивная экспрессия -SMA в клетках мезангия

Рис. 6. Позитивная экспрессия -SMA в клетках мезангия. Ув.:ок.10 х об.100.

При длительном воздействии этанола повышенная функциональная активность мезангиальных клеток приводит к уменьшению уровня клубочковой фильтрации. Повышенная синтетическая активность мезангиальных клеток приводит к утолщению гломерулярной базальной мембраны, что является одной из структурных признаков нарушения фильтрационного барьера нефрона. Также вследствие синтетической деятельности мезангиальных клеток увеличивается объем матрикса мезангия и повышается содержание в нем тонковолокнистых структур, что приводит к снижению интенсивности фильтрации через фильтрационный барьер. 

Выводы:
Большое значение в развитии фиброгенеза в почках придается макрофагальной инфильтрации, а также увеличению числа и активацию главных клеток фиброгенеза – фибробластов, которые в здоровых почках находятся в покоящемся состоянии и отвечают за поддержание экстрацеллюлярно-матриксного гомеостаза. На этапе поствоспалительного синтеза матрикса на фоне уменьшения степени интерстициальной клеточной инфильтрации фибробласты и мезангиальніе клетки остаются активированными, и экстрацеллюлярно-матриксный компонент откладывается постоянно в увеличивающемся количестве, что ведет к нарушению органных функций и деструкции органной архитектуры.

Литература:
1. Козловская Л.В., Тареева И.В., Мухин Н.А., Неверов Н.И., Каррыева Б.Ч. Мочевые тесты воспаления при гломерулонефрите Тер. архив 1994: 6: 11-15.
2. Назаров П.Г. В кн.: Реактанты острой фазы воспаления. Глава I. М.:Наука, 2001: 423.
3. Пальцев М.А., Иванов А.А. В кн.: Межклеточные взаимодействия. Глава I. М: Медицина, 1995.
4. Плиева О.К. Влияние препаратов с антипротеинурическим действием на экскрецию с мочой больных факторов эндотелия и локальнопочечного фибринолиза⁄протеолиза: Автореф. дисс.... канд. мед. наук М., 2003.
5. Abbate M., Benigni A., Bertani T., Remuzzi G. Nephrotoxicity of increased glomerular protein traffic. Nephrol Dial Transplant 1999; 14: 304-312.
6. Abbate M., Zoja C., Corna D. et al. In progressive nephropathies overload of tubular cells with filtered proteins translates glomerular permeability dysfunction into cellular signals of interstitial inflammation. J Am Soc Nephrol 1998; 9: 1213-1224.
7. Alexopoulus E., Seron D., Hatley R.B. et al. Lupus nephritis: correlation of interstitial cells with glomerular function. Kidney Int 1990; 37: 100. 

10
Ваша оценка: Нет Средняя: 10 (13 голосов)
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.