facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Wiki
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip

Морфометрические показатели лимфатических узлов крыс после применения имунофана

Автор Доклада: 
Кащенко С.А., Петизина О.Н.
Награда: 
Морфометрические показатели лимфатических узлов крыс после применения имунофана

УДК 591.446:615.37

 

МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ КРЫС ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ ИМУНОФАНА

 

Кащенко Светлана Аркадьевна, д.мед.н., проф.
Луганский государственный медицинский университет
Петизина Ольга Николаевна, аспирант

 

Исследование проводилось на 36 крысах самцах. Животным вводился однократно циклофосфан с последующим введением имунофана по схеме. Изучались морфометрические параметры коркового вещества правых подмышечных лимфатических узлов. Исследование показало, что максимальные изменения параметров наблюдаются на 7 сутки после введения препарата.
Ключевые слова: лимфатические узлы, лимфатические узелки, циклофосфан, имунофан, крысы.

Вступление. Анализ состояния окружающей среды свидетельствует о том, что в настоящее время Украина является одной из экологически неблагоприятных стран Европы. Наиболее остро экологические проблемы стоят в регионе Донбасса, где сконцентрированы предприятия по добычи угля, металлургии, химии, что непосредственно сказывается на высоком уровне заболеваемости, отражает тенденцию к снижению продолжительности жизни при отрицательном приросте населения, высокой смертности среди мужчин работоспособного возраста, нарастании числа хронических заболеваний. По имеющимся статистическим данным четко выраженные иммунные нарушения обнаружены у 95 % населения Донбасса [1]. В основе этих особенностей инфекционного и эпидемического процессов лежит неблагоприятное воздействие экологически вредных факторов окружающей среды на иммунную систему человека, цитогенетические показатели, нарушение иммунологического гомеостаза, снижение показателей естественной антиинфекционной резистентности [2]. В связи с этим в большинстве случаев необходимо применение иммуномодуляторов в комплексном лечении. Имунофан – это синтетический препарат, который является модифицированным фрагментом биологически активного участка молекулы гормона тимогена и сохраняет специфическую активность природного гормона. На фоне иммунодефицитных состояний препарат способен восстанавливать продукцию тимического гормона иммунитета – тимулина, в связи с этим регуляторные свойства имунофана были задействованы для коррекции иммунной реакции организма [3, 4, 5, 6]. Строение и функционирование иммунной системы человека и крысы имеют много общего [7], поэтому крысы используются в качестве подопытных животных в эксперименте. Лимфатические узлы относятся к периферическим органам иммунной защиты и выполняют функцию антигензависимой дифференцировки, пролиферации Т- и В- лимфоцитов. Цельюработы послужило изучение морфометрических параметров подмышечных лимфатических узлов после применения имунофана на фоне проведенной иммуносупресии с помощью циклофосфана. Работа является частью научно-исследовательской темы кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии ГЗ «Луганский государственный медицинский университет» «Особливості будови деяких органів імунної, ендокринної та нервової систем під впливом екзогенних чинників», Государственный регистрационный номер 0106U006009.

Материалы и методы. Исследование проведено на 36 белых беспородных крысах-самцах неполовозрелого возраста ювенильного периода, массой 150-200 г. Первой группе животных вводили однократно циклофосфан внутримышечно в дозе 2,86 мкг/кг, затем вводили имунофан по 0,71 мкг/кг на 1, 3, 5, 7, 9 сутки после инъекции циклофосфана. Второй группой служили интактные животные. Содержание, уход за животными осуществляли согласно закону Украины «Про захист тварин від жорсткого поводження» от 21.02.2006 р., № 3447, положениям Европейского научного сообщества «Использование животных в исследованиях» (2000) [8].

Выведение животных из эксперимента проводилось в одно и то же время суток под эфирным наркозом на 7, 30, 90 сутки после завершения инъекций. Выделяли правые подмышечные лимфатические узлы, фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Изготавливали гистологические срезы толщиной 5–6 мкм, окрашивали гематоксилин-эозином. Анализ изображений объектов проводили с помощью аппаратно-программного комплекса, включающего фотоаппарат Olympus C5050Z, микроскопOlympus ВХ 41. Использовали оригинальную морфометрическую программу «Morpholog» [9]. Измеряли больший и меньший диаметры лимфатических узелков (рис. А – 1, Б – 1) и их герминативных центров (рис. А – 2, Б – 2). Морфометрический подсчет проводился в шести полях зрения каждого среза, анализировались шесть срезов с каждого объекта.

Результаты и обсуждение. Полученные данные (таб. 1) свидетельствуют о том, что однократное введение циклофосфана, с последующим введением имунофана по схеме влияет на подмышечные лимфатические узлы таким образом: на 7 сутки наблюдается увеличение

Рис. 1. Лимфатические узелки коркового вещества правого подмышечного лимфатического узла А – первой группы, Б – второй группы животных при заборе материала на 7 сутки. 1 – герминативный центр, 2 – корона. Окраска гематоксилин-эозин. Приближение Zoom 162. Об. – PlanC N 10x0.25 ~/–/ FN22.

 

большего диаметра лимфатических узелков на 67,99%, меньшего – на 56,42%. Также отмечается значительное увеличение параметров герминативных центров, большего диаметра на 209,70%, меньшего – на 187,29%. На 30 сутки размеры лимфатических узелков резко уменьшаются в сравнении с 7 сутками. В сравнении с контрольной группой диаметры лимфатических узелков увеличиваются: больший на 8,13%, меньший на 8,81%, больший диаметр герминативных центров уменьшается на 10,97%, меньший диаметр возрастает на 22,68%. На 90 сутки наблюдается незначительное увеличение всех морфометрических показателей коркового вещества: большие диаметры на 3,11% и 6,39%, меньшие на 13,53% и 11,68% соответственно (рис. 2).

Рис. 2. Динамика изменения морфометрических показателей лимфатических узелков коркового вещества подмышечных лимфатических узлов крыс на 7 сутки (М±mn=36)

(D1 – больший диаметр лимфатического узелка, D2 – меньший диаметр лимфатического узелка, d1 – больший диаметр герминативного центра, d2 – меньший диаметр герминативного центра)

Таблица 1

МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЕЛКОВ КОРКОВОГО ВЕЩЕСТВА ПОДМЫШЕЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ КРЫС НА 7, 30, 90 СУТКИ ПОСЛЕ ПОСЛЕДНЕГО ВВЕДЕНИЯ ПРЕПАРАТА (М±m, n=36)

Срок забора материала

Группа

животных

Максимальный диаметр лимфатического узелка (мкм)

Минимальный диаметр лимфатического узелка (мкм)

Максимальный диаметр герминативного центра (мкм)

Минимальный диаметр герминативного центра (мкм)

7 сутки

1 группа

551,0 ± 27,5

463,0 ± 23,1

415,0 ± 19,8

339,0 ± 16,2

2 группа

328,0 ± 13,2

296,0 ± 13,7

134,0 ± 5,6

118,0 ± 3,7

30 сутки

1 группа

439,0 ± 17,5

383,0 ± 9,6

284,0 ± 8,3

238,0 ± 2,4

2 группа

406,0 ± 14,1

352,0 ± 9,3

319,0 ± 15,6

194,0 ± 7,9

90 сутки

1 группа

498,0 ± 24,0

453,0 ± 20,9

283,0 ± 11,7

239,0 ± 8,9

2 группа

483,0 ± 35,8

399,0 ± 45,9

266,0 ± 23,9

214,0 ± 10,1

Выводы. На 7 сутки после воздействия препарата происходит повышение иммунной активности лимфатических узлов, так как наблюдается максимальное увеличение всех морфометрических показателей коркового вещества органа. На 30, 90 сутки наблюдается восстановление данных морфометрических параметров лимфатических узелков, что может свидетельствовать о нормализации иммунных процессов на поздних сроках исследования.

В дальнейших публикациях планируется осветить результаты электронного микроскопического исследования правых подмышечных лимфатических узлов крыс разных возрастных групп в условиях эксперимента.

 

Литература:

 

1. Фролов В. М. Проблемы иммуноэкологии: от синдрома повышенной утомляемости до синдрома хронической усталости // В. М. Фролов, Г. Н. Дранник / Імунологія та алергологія. – 1998. – №1. – С. 6981.
2. Кундиев Ю. И. Структурный анализ фармирования здоровья населения Украины в экологически неблагоприятных условиях / Ю. И. Кундиев, А. М. Нагорная, В. В. Кальниш // Профілактична медицина. – 2003. – Т. 9, № 1. – С. 93103.
3. Арион В. Я. Иммунобиологические свойства и клинические применение тимозинов и других препаратов тимуса // В. Я. Арион, И. В. Зимина, С. Н. Москвина / Иммунология, аллергология, инфектология / – 2008. – № 1. – С. 26–40.
4. Ковешніков В. Г. Ультрабудова органів імунної та ендокринної систем в умовах імуностимуляції / В. Г. Ковешніков, С. А. Кащенко, О. С. Болгова // Biomedical and Biosocial Anthropologyю.  2004.  №2.  C. 165168.
5. Nakahara T. Cyclophosphamide enhances immunity by modulating the balance of dendritic cell su bsets inlymphoid organs / T. NakaharaH. UchiA. MLesokhin [etc] // Blood. – 2010. – V. 115. – № 22. – P. 4384 – 4392.
6. Zakharov A. A. Morphological changes of thymus structure of immature rats after imunofan administration / A.AZakharov // Український медичний альманах. – 2009. – Т. 12, № 1. – С. 6667.
7. Кащенко С. А. Морфологические характеристики и методика выделения селезенки, тимуса и подмышечных лимфатических узлов у белых лабораторных крыс / С. А Кащенко, Е. К. Нужная // Проблеми екологічної та медичної генетики і клінічної імунології: Зб. наук. праць. – 2003. - №2 (48). – С. 168172.
8. Закон Украины «Про захист тварин від жорсткого поводження» от 21.02.2006 р., № 3447.
9. Овчаренко В. В. Комп’ютерна програма для морфометричних досліджень «Morpholog» // В. В.Овчаренко, В. В. Маврич / Свідоцтво про реєстрацію авторського права на твір № 9604, дата реєстрації 19.03.2004.

8.125
Ваша оценка: Нет Средняя: 8.1 (8 голосов)

интересное

интересное исследование

Как соотносятся полученные

Как соотносятся полученные результаты с данными литературы о фармакодинамике применённых препаратов?И почему была выбрана именно такая схема введения циклофосфана?

Спасибо за вопрос. По данным

Спасибо за вопрос. По данным литературы такая дозировкациклофосфана достаточно высокая , что приводит к иммунносупресии, поэтому вводится однократно. Данная схема введения предложена рядом известных зарубежных авторов. Исходя из того,что органы центральной имунной защиты были изучены в полной мере , то целью нашего исследования было изучить изменения в периферических органах иммунногенеза, которые изучены еще не достаточно и данные о них являются не полными.
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.