facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip
Перевод страницы
 

КИНЕТИКО-СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ В МИЦЕЛЛЯРНОЙ СРЕДЕ

КИНЕТИКО-СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ В МИЦЕЛЛЯРНОЙ СРЕДЕ
Любомир Крыськив, соискатель

Николай Блажеевский, профессор, доктор химических наук, профессор

Харьковский национальный фармацевтический университет, Украина

Участник конференции

УДК 54.062:542.938:543.42.062УДК 54.062:542.938:543.42.062
Предложена новая кинетико-спектрофотометрическая методика определения ацетилсалициловой кислоты (AСК) в мицеллярной среде в субстанции и в таблетках Кардиомагнил®, покрытых оболочкой, по 75 мг . Метод основан на индикаторной реакции каталитического окисления 3,3',5,5'-тетраметилбензидина пероксикислотой, образованной в реакции пергидролиза AСК с избытком пероксида водорода в присутствии неионогенного ПАВ Тriton X-100, с образованием окрашенного 3,3',5,5'-тетраметилдифенохинондииминового производного (λмакс=427нм). Аналитические характеристики методик были валидированы статистически по LOD, LOQ, точности (сходимости и правильности) и линейности. Предлагаемая методика была успешно применена при анализе коммерческой лекарственной формы, содержание среднего 98,9% при RSD ≤ 2,0%.
Ключевые слова: поверхностно-активное вещество, мицеллярный катализ, 3,3',5,5'-тетраметилбензидин,определение ацетилсалициловой кислоты
A new kinetic spectrophotometric procedure for the determination of acetylsalicylic acid (ASA) in micellar medium, either in pure form or in film-coated tablets Cardiomagnil® 75 mg is proposed. The method is based on the indicator reaction of catalytic 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine oxidation by generate peracid formed from the ASA perhydrolysis with excess of hydrogen peroxide in the presence of nonionic surfactant Тriton X-100 to give colored 3,3',5,5'-tetrametyldiphenoquinone diimine derivative (λmax=427nm). The analytical performance of the methods was validated statistically with respect to LOD, LOQ, accuracy, precision and linearity. Proposed method has been successfully applied to the commercial dosage form with the recovery 98.9% and the RSD below 2.0%.
Keywords: surfactant, micellar catalysis, 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, acetylsalicylic acid determination.
 
 
Ацетилсалициловая кислота (АСК), известная как аспирин – один из наиболее применяемых в медицине лекарственных препаратов – широко используется как обезболивающее, жаропонижающее и противовоспалительное средство. АСК обладает
антиагрегантными свойствами [1]. Государственная Фармакопея (ГФ) Украины и Британская Фармакопея рекомендуют определять АСК титриметрически [2, 3]. В научной литературе описано также большое количество методик определения АСК методами спектрофотометрии [4], потенциометриии [5], UPLC [6] и др. [7, 8]. Самоорганизующиеся среды – мицеллярные растворы коллоидных ПАВ в настоящее время находят широкое применение в аналитической химии, а также в мембранной технологии, в биохимии, фотохимии, для мицеллярного катализа и других областях [9]. Сообщается о применении гексадецилпиридиний хлорида для осуществления потенциометрического определения АСК в водной среде [10]. Ранее нами уже была описана методика кинетического определения АСК, основанная на реакции пергидролиза (с избытком пероксида водорода в слабощелочной среде) с использованием п-фенетидина как хромогенного субстрата для детектирования образованной перуксусной кислоты (ПК) [11]. Особенностью ее является возможность избирательного определения АСК в присутствии продуктов ее гидролиза.
 
Нами предложено количественное определение АСК осуществлять дифференциальным кинетико-спектрофотометрическим методом тангенсов по начальной скорости образования продукта сопряженных реакций пергидролиза АСК и пероксикислотного окисления 3,3´,5,5´-тетриметилбензидина (ТМБ) – 3,3',5,5'-тетраметилдифенохинондиимина (λмакс=427нм) в присутствии неионогенного ПАВ Тriton X-100.
 
Экспериментальная часть. Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Evolution™ 60S UV-Vis. Для измерения рН применяли лабораторный иономер И-130 (НПО "Аналитприбор") со стеклянным электродом ЭСЛ 43-07. Субстанция ацетилсалициловой кислоты (АСК) которая отвечала требованиям ГФ Украины (w = 95%). 3,3',5,5'-тетраметилбензидина дигидрохлорида гидрат ≥97% (Sigma-Aldrich), раствор 2 × 10-2 моль/л ТМБ, приготовленный на 50% этаноле. Использовали ПАВ: додецилсульфат натрия (ДДС-Na) ≥95% (Sigma), цетилпиридиния хлорид (ЦП) 99,0-102,0% (Merck), Triton X-100 (ТХ) l. grade (Sigma-Aldrich). Раствор пероксида водорода 30%, приготовлен из «Перекиси водорода» 50%, медицинской (ООО «Интер-Синтез», Борислав, Украина). 0,2 М фосфатный буферный раствор с рН 8,3: растворяли 12 г NaH2PO4 в 450 мл ДДВ и добавляли 50,6 мл NaOH 1,9 моль/л. Кардиомагнил®, таблетки в пленочной оболочке по 75 мг АСК и Mg(OH)2 – 15,2 мг (Такеда Австрия ГмбХ, № сер. 10923661). Все растворители и другие реактивы, которые использовались в этой работе, были квалификации «ХЧ» и «ЧДА».
 
Приготовление раствора стандарта АСК, 8 × 10-4 моль/л. 0,14415 г АСК (точная навеска), растворяли в 50 мл этанола в 100 мл мерной колбе, доводили до метки дважды дистиллированной водой и тщательно перемешивали. С помощью пипетки отбирали 10 мл
полученного раствора, переносили в мерную колбу на 100 мл, объем доводили до метки дважды дистиллированной водой и снова тщательно перемешивали.
 
Приготовление раствора препарата Кардиомагнил®. 0,144 г (точная навеска) порошка растертых таблеток смешивали с 20 мл этанола, взбалтывали 5 мин, фильтровали через бумажный фильтр с красной лентой в мерную колбу на 50 мл, доводили дважды дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивали. Все растворы готовили непосредственно перед применением.
 
Общая процедура определения. С помощью пипетки отбирают от 0,5 до 5 мл стандартного раствора АСК (или 2 мл раствора препарата АСК) и последовательно вносят в мерные колбы на 25 мл. Добавляют в каждую по 10 мл буферного раствора, 3 мл раствора ТМБ и 1 мл раствора пероксида водорода. Объем раствора доводят до метки дважды дистиллированной водой и тщательно взбалтывают, после чего раствор сразу же спектрофотометрируют при 427нм, используя как компенсационнный раствор холостого опыта. Отсчет времени начинают с момента смешивания растворов с помощью секундомера. Полученные кинетические данные переносят в Excel 2003 для построения кривых, регрессионного анализа и статистических расчетов согласно рекомендаций IUPAC [12] и ГФ Украины [2]. Содержание АСК находят с помощью метода стандарта.
 
Результаты и обсуждение. Для определения АСК использована как аналитическая сопряженная реакция, которая базируется на взаимодействии АСК с избытком пероксида водорода в слабощелочной среде с образованием ПК (индуктор процесса), которая быстро взаимодействует с ТМБ, образуя окрашенный 3,3',5,5'-тетраметилдифенохинондиимин, по поглощению которого и осуществляют собственно определение [13]. Ранее одним из авторов было доказано, что присутствие продуктов гидролитичного разложения препарата не мешает определению основного вещества [11]. Для исследования влияния ПАВ на чувствительность определения АСК заведомо были выбраны три типа ПАВ: катионное – ЦП, анионное – ДДС-Na и неионогенное – ТХ. Оказалось, что наличие в реакционной смеси ДДС-Na на уровне критической концентрации мицеллообразования (ККМ) (1,6×10-3 моль/л) приводит к образованию осадка, поэтому в дальнейшем использовали только ЦП (ККМ 1,0×10-3 моль/л) и ТХ (ККМ 2,3×10-4 моль/л). В присутствии ПАВ в диапазоне 350 - 550 нм наблюдали батохромный сдвиг максимума полосы поглощения образующегося продукта реакции, что можно объяснить влиянием мицеллярной среды (Рис.1). Смещение максимума в длинноволновую область дополнительно повышает избирательность определения АСК в присутствии вспомогательных веществ, которые могут неспецифически поглощать на этом участке спектра. Кинетические кривые, полученные в оптимальных условиях протекания индикаторной реакции [14] в присутствии ПАВ в зависимости от концентрации АСК приведены на Рис. 2.
 
Рис. 1. Спектры поглощения продукта реакции сопряженного окисления ТМБ перекисью водовода в присутствии АСК в присутствии ПАВ. Время, мин: 1 – 2, 2 – 6, 3 – 10, 4 – 13, 5 – 16, 6 – 19, с (ТМБ) = 1,6 × 10-3 моль/л, с (Н2О2) = 0,36 моль/л, с (АСК) = 6,6 × 10-5 моль/л, с (ЦП) = с (TX) = 1,0 × 10-3 моль/л, Т = 293 К.
 
Относительную начальную скорость реакции (tg, мин-1) определяли по тангенсу угла наклона начального участка кинетической кривой. Зависимость относительной начальной скорости реакции от концентрации АСК для рассматриваемых систем в условиях псевдопервого порядка носит линейный характер (Рис. 3). Увеличение наклона концентрационной зависимости tg в присутствии ПАВ по сравнению с таким в их отсутствии может свидетельствовать о реализации мицеллярного катализа. Регрессионные характеристики полученных концентрационных зависимостей (градуировочный график) были рассчитаны с помощью метода наименьших квадратов (Табл. 1). Предел определения (LOD) и предел количественного определения (LOQ) рассчитаны по стандартным отклонениям отклика и наклона градуировочного графика, LOD = 3 × Sa/b, LOQ = 10 × Sa/b, где Sa –стандартное отклонение отклика, b – наклон градуировочного графика. Наименьшее значение величины LOD и наибольшее значение наклона градуировочной зависимости для методики с ТХ свидетельствует о ее наивысшей чувствительности определения АСК.
 
Линейность этой методики была оценена согласно ГФ Украины в системе нормализированных координат (r=0,9998) [2]. Значения a и |b-1| не превышали доверительных интервалов своих неопределенностей (требование статистической незначимости), а ≤ t(95%, n-2) × sa (2,3 < 3,0) и |b-1| ≤ t(95%, n-2) × sb (1,5×10-4 < 2,4×10-2).
Рис. 2. Кинетические кривые реакции образования 3,3',5,5'- тетраметилдифенохинондиимина в системе АСК - ТМБ - H2O2 в присутствии ПАВ. с (ТМБ) = 1,6 × 10-3 моль/л, с (Н2О2) = 0,36 моль/л, с (ЦП) = с (ТХ) = 1,0 × 10-3 моль/л, с(АСК) 10-5, моль/л, 1 = 3,2, 2 = 6,4, 3 = 13; Т = 293 К.
 
Рис. 3. Концентрационные зависимости скорости аналитической реакции ТМБ - Н2О2 – АСК в присутствии и отсутствии (сплошная линия) ПАВ. с (ТМБ) = 2,4 × 10-3 моль/л, с (Н2О2) = 0,224 моль/л, с (ЦП) = с (ТХ) = 1,0 × 10-3 моль/л, Т = 293 К.
 
Также для нее была установлена точность (precision и accuracy) определения на трѐх уровнях концентраций АСК. RSD ≤ 2,0%, (Табл. 2) что свидетельствует об удовлетворительной воспроизводимости и точности полученных результатов.
 
Таблица 1.
Данные регрессионного анализа

Параметр

Значение

Без ПАВ

ЦП

ТХ

Линейность,

(10-5,моль/л)

3,3 - 16,6

3,3 - 16,6

1,7-13,3

Уравнение градуировочного графика*

tga= 134,34[АСК]+2×10-3

tga= 152,3[АСК]+1×10-3

tga= 162,05[АСК]+ 2×10-2

Sb

3,935

3,188

1,162

±tSb

10,925

8,850

3,225

Sa

2,0×10-3

3,5×10-4

9,5×10-5

±tSa

1,2×10-3

9,75×10-4

2,6×10-4

LOD(моль/л)

9,7×10-6

6,5×10-6

1,9×10-6

LOQ(моль/л)

3,3×10-5

2,2×10-5

6,2×10-6

Таблица 2.
Точность предложенной методики (n = 5, Р = 0,95)

Введено

(10-5,моль/л)

Найдено

(± Δ)

% ± RSD

δ (%)

3,30

3,35± 0,08

100,9± 2,0

0,9

6,60

6,67± 0,12

100,5± 1,5

0,5

10,00

9,88± 0,14

99,2± 1,1

-0,8

В таблице 3 приведены результаты определения АСК в двухкомпонентном лекарственном препарате Кардиомагнил® (n = 5, Р = 0,95).
 
Таблица 3.
Результаты определения АСК в препарате Кардиомагнил® (n = 5, Р = 0,95)

Заявленное содержание (мг)

Найдено,± Δх(мг)

%±RSD (%)

δ (%)

75,8*

74,9± 1,8

98,9± 2,0

-1,07

* Содержание АСК установлено с помощью стандартной фармакопейной методики [3].
 
 
Литература:
  • 1. Sweetman S.: Martindale: The complete drug reference. Pharmaceutical Press, London, 2007.
  • 2. ДФУ. – Х., 2001; ДФУ. Доповнення 1. – Х., 2004; ДФУ. Доповнення 2. –Х., 2008; ДФУ. Доповнення 3. – Х., 2010.
  • 3. British Pharmacopoeia, The Stationery Office on behalf of the Medicines and Healthcare products Regulatory Agency, London 2009, P. 386–389
  • 4. Wanga Y. Monitoring the hydrolyzation of aspirin during the dissolution testing for aspirin delayed-release tablets with a fiber-optic dissolution system / Y. Wanga, P. Xua et al. // J. Pharm. Anal. – 2012. – V.2, №5. – P. 386–389
  • 5. Wang Z. Acetylsalicylic acid electrochemical sensor based on PATP–AuNPs modified molecularly imprinted polymer film / Z. Wang, H. Li, J. Chen et al. // Talanta. – 2011. – V.85, №3. – P. 1672–1679.
  • 6. Reddy Y. Rapid simultaneous determination of aspirin and esomeprozole magnesium in combined tablets by validated ultra performance liquid chromatographic method / Y. Reddy, S. Reddy, M. Reddy, K. Mukkanti // J. Chem. Pharm. Res. − 2013. – Vol. 5, № 4. – P. 181–187
  • 7. Campanella L. Kinetic investigation and predictive model for the isothermal degradation time in two commercial acetylsalicylic acid-based pharmaceutical tablet formulations / L. Campanella, V. Micieli, M. Tomassetti et al. // Thermochim. Acta. – 2011. – V.526, №1–2. – P. 151–156.
  • 8. Shaw L. Simultaneous determination and pharmacokinetics of protein unbound aspirin and salicylic acid in rat blood and brain by microdialysis: An application to herbal–drug interaction / L. Shaw, T. Tsai // J. Chromatogr. B. – 2012. – V.895–896. – P.31–38.
  • 9. Штыков С. Н. Мицеллярная тонкослойная хроматография: особенности и аналитические возможности / С. Н. Штыков, Е.Г.Сумина, Н.В Тюрина // Рос. хим. ж. – 2003. – Т. 57, №1. – с. 110-126
  • 10. Issopoulos P.B. Micelle-assisted dissolution for the analysis of aspirin by second-order derivative potentiometry / P.B. Issopoulos // Fresenius J. Anal. Chem. – 1997. – Vol. 358. – P. 663-666
  • 11. Блажеєвський М.Є. Кінетичне визначення аспірину / М.Є. Блажеєвський // Фармац. журнал. – 2004. – №3. – С. 65-72.
  • 12. Экспериандова Л. П. Еще раз о пределах обнаружения и определения / Л. П. Экспериандова, К. Н. Беликов, С. В. Химченко, Т. А. Бланк // Журн. аналит. химии. – 2010. – Т. 65, № 3. – с. 229–234.
  • 13. Josephy P Horseradish peroxidase oxidation / P. Josephy, T. Eling, R. Mason // J. Biol. Chem. – 1982. – Vol. 257, P. 3669-3675.
  • 14. Блажеєвський М.Є. Кінетико-спектрофотометричне визначення спазмолітину / М.Є. Блажеєвський, Л.С. Криськів // Фармац. журнал. – 2012. – №6. –С. 67-73.
КИНЕТИКО-СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЦЕТИЛСАЛИЦИЛОВОЙ КИСЛОТЫ В МИЦЕЛЛЯРНОЙ СРЕДЕ
Блажеевский Н. Е., д.х.н, профессор
Крыськив Л.С., ст. лаборант
Национальный фармацевтический университет, ул. Блюхера, 4, Харьков, 61168 Украина
Участники конференции
Предложена новая кинетико-спектрофотометрическая методика определения ацетилсалициловой кислоты (AСК) в мицеллярной среде в субстанции и в таблетках Кардиомагнил®, покрытых оболочкой, по 75 мг . Метод основан на индикаторной реакции каталитического окисления 3,3',5,5'-тетраметилбензидина пероксикислотой, образованной в реакции пергидролиза AСК с избытком пероксида водорода в присутствии неионогенного ПАВ Тriton X-100, с образованием окрашенного 3,3',5,5'-тетраметилдифенохинондииминового производного (λмакс=427нм). Аналитические характеристики методик были валидированы статистически по LOD, LOQ, точности (сходимости и правильности) и линейности. Предлагаемая методика была успешно применена при анализе коммерческой лекарственной формы, содержание среднего 98,9% при RSD ≤ 2,0%.
Ключевые слова: поверхностно-активное вещество, мицеллярный катализ, 3,3',5,5'-тетраметилбензидин,определение ацетилсалициловой кислоты
A new kinetic spectrophotometric procedure for the determination of acetylsalicylic acid (ASA) in micellar medium, either in pure form or in film-coated tablets Cardiomagnil® 75 mg is proposed. The method is based on the indicator reaction of catalytic 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine oxidation by generate peracid formed from the ASA perhydrolysis with excess of hydrogen peroxide in the presence of nonionic surfactant Тriton X-100 to give colored 3,3',5,5'-tetrametyldiphenoquinone diimine derivative (λmax=427nm). The analytical performance of the methods was validated statistically with respect to LOD, LOQ, accuracy, precision and linearity. Proposed method has been successfully applied to the commercial dosage form with the recovery 98.9% and the RSD below 2.0%.
Keywords: surfactant, micellar catalysis, 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, acetylsalicylic acid determination
Ацетилсалициловая кислота (АСК), известная как аспирин – один из наиболее применяемых в медицине лекарственных препаратов – широко используется как обезболивающее, жаропонижающее и противовоспалительное средство. АСК обладает
антиагрегантными свойствами [1]. Государственная Фармакопея (ГФ) Украины и Британская Фармакопея рекомендуют определять АСК титриметрически [2, 3]. В научной литературе описано также большое количество методик определения АСК методами спектрофотометрии [4], потенциометриии [5], UPLC [6] и др. [7, 8]. Самоорганизующиеся среды – мицеллярные растворы коллоидных ПАВ в настоящее время находят широкое применение в аналитической химии, а также в мембранной технологии, в биохимии, фотохимии, для мицеллярного катализа и других областях [9]. Сообщается о применении гексадецилпиридиний хлорида для осуществления потенциометрического определения АСК в водной среде [10]. Ранее нами уже была описана методика кинетического определения АСК, основанная на реакции пергидролиза (с избытком пероксида водорода в слабощелочной среде) с использованием п-фенетидина как хромогенного субстрата для детектирования образованной перуксусной кислоты (ПК) [11]. Особенностью ее является возможность избирательного определения АСК в присутствии продуктов ее гидролиза.
Нами предложено количественное определение АСК осуществлять дифференциальным кинетико-спектрофотометрическим методом тангенсов по начальной скорости образования продукта сопряженных реакций пергидролиза АСК и пероксикислотного окисления 3,3´,5,5´-тетриметилбензидина (ТМБ) – 3,3',5,5'-тетраметилдифенохинондиимина (λмакс=427нм) в присутствии неионогенного ПАВ Тriton X-100.
Экспериментальная часть. Спектры поглощения регистрировали на спектрофотометре Evolution™ 60S UV-Vis. Для измерения рН применяли лабораторный иономер И-130 (НПО "Аналитприбор") со стеклянным электродом ЭСЛ 43-07. Субстанция ацетилсалициловой кислоты (АСК) которая отвечала требованиям ГФ Украины (w = 95%). 3,3',5,5'-тетраметилбензидина дигидрохлорида гидрат ≥97% (Sigma-Aldrich), раствор 2 × 10-2 моль/л ТМБ, приготовленный на 50% этаноле. Использовали ПАВ: додецилсульфат натрия (ДДС-Na) ≥95% (Sigma), цетилпиридиния хлорид (ЦП) 99,0-102,0% (Merck), Triton X-100 (ТХ) l. grade (Sigma-Aldrich). Раствор пероксида водорода 30%, приготовлен из «Перекиси водорода» 50%, медицинской (ООО «Интер-Синтез», Борислав, Украина). 0,2 М фосфатный буферный раствор с рН 8,3: растворяли 12 г NaH2PO4 в 450 мл ДДВ и добавляли 50,6 мл NaOH 1,9 моль/л. Кардиомагнил®, таблетки в пленочной оболочке по 75 мг АСК и Mg(OH)2 – 15,2 мг (Такеда Австрия ГмбХ, № сер. 10923661). Все растворители и другие реактивы, которые использовались в этой работе, были квалификации «ХЧ» и «ЧДА».
Приготовление раствора стандарта АСК, 8 × 10-4 моль/л. 0,14415 г АСК (точная навеска), растворяли в 50 мл этанола в 100 мл мерной колбе, доводили до метки дважды дистиллированной водой и тщательно перемешивали. С помощью пипетки отбирали 10 мл
полученного раствора, переносили в мерную колбу на 100 мл, объем доводили до метки дважды дистиллированной водой и снова тщательно перемешивали.
Приготовление раствора препарата Кардиомагнил®. 0,144 г (точная навеска) порошка растертых таблеток смешивали с 20 мл этанола, взбалтывали 5 мин, фильтровали через бумажный фильтр с красной лентой в мерную колбу на 50 мл, доводили дважды дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивали. Все растворы готовили непосредственно перед применением.
Общая процедура определения. С помощью пипетки отбирают от 0,5 до 5 мл стандартного раствора АСК (или 2 мл раствора препарата АСК) и последовательно вносят в мерные колбы на 25 мл. Доба cellspacing=вляют в каждую по 10 мл буферного раствора, 3 мл раствора ТМБ и 1 мл раствора пероксида водорода. Объем раствора доводят до метки дважды дистиллированной водой и тщательно взбалтывают, после чего раствор сразу же спектрофотометрируют при 427нм, используя как компенсационнный раствор холостого опыта. Отсчет времени начинают с момента смешивания растворов с помощью секундомера. Полученные кинетические данные переносят в Excel 2003 для построения кривых, регрессионного анализа и статистических расчетов согласно рекомендаций IUPAC [12] и ГФ Украины [2]. Содержание АСК находят с помощью метода стандарта.
Результаты и обсуждение. Для определения АСК использована как аналитическая сопряженная реакция, которая базируется на взаимодействии АСК с избытком пероксида водорода в слабощелочной среде с образованием ПК (индуктор процесса), которая быстро взаимодействует с ТМБ, образуя окрашенный 3,3',5,5'-тетраметилдифенохинондиимин, по поглощению которого и осуществляют собственно определение [13]. Ранее одним из авторов было доказано, что присутствие продуктов гидролитичного разложения препарата не мешает определению основного вещества [11]. Для исследования влияния ПАВ на чувствительность определения АСК заведомо были выбраны три типа ПАВ: катионное – ЦП, анионное – ДДС-Na и неионогенное – ТХ. Оказалось, что наличие в реакционной смеси ДДС-Na на уровне критической концентрации мицеллообразования (ККМ) (1,6×10-3 моль/л) приводит к образованию осадка, поэтому в дальнейшем использовали только ЦП (ККМ 1,0×10-3 моль/л) и ТХ (ККМ 2,3×10-4 моль/л). В присутствии ПАВ в диапазоне 350 - 550 нм наблюдали батохромный сдвиг максимума полосы поглощения образующегося продукта реакции, что можно объяснить влиянием мицеллярной среды (Рис.1). Смещение максимума в длинноволновую область дополнительно повышает избирательность определения АСК в присутствии вспомогательных веществ, которые могут неспецифически поглощать на этом участке спектра. Кинетические кривые, полученные в оптимальных условиях протекания
индикаторной реакции [14] в присутствии ПАВ в зависимости от концентрации АСК приведены на Рис. 2.
Рис. 1 Спектры поглощения продукта реакции сопряженного окисления ТМБ перекисью водовода в присутствии АСК в присутствии ПАВ. Время, мин: 1 – 2, 2 – 6, 3 – 10, 4 – 13, 5 – 16, 6 – 19, с (ТМБ) = 1,6 × 10-3 моль/л, с (Н2О2) = 0,36 моль/л, с (АСК) = 6,6 × 10-5 моль/л, с (ЦП) = с (TX) = 1,0 × 10-3 моль/л, Т = 293 К.
Относительную начальную скорость реакции (tg, мин-1) определяли по тангенсу угла наклона начального участка кинетической кривой. Зависимость относительной начальной скорости реакции от концентрации АСК для рассматриваемых систем в условиях псевдопервого порядка носит линейный характер (Рис. 3). Увеличение наклона концентрационной зависимости tg в присутствии ПАВ по сравнению с таким в их отсутствии может свидетельствовать о реализации мицеллярного катализа. Регрессионные характеристики полученных концентрационных зависимостей (градуировочный график) были рассчитаны с помощью метода наименьших квадратов (Табл. 1). Предел определения (LOD) и предел количественного определения (LOQ) рассчитаны по стандартным отклонениям отклика и наклона градуировочного графика, LOD = 3 × Sa/b, LOQ = 10 × Sa/b, где Sa –стандартное отклонение отклика, b – наклон градуировочного графика. Наименьшее значение величины LOD и наибольшее значение наклона градуировочной зависимости для методики с ТХ свидетельствует о ее наивысшей чувствительности определения АСК.
Линейность этой методики была оценена согласно ГФ Украины в системе нормализированных координат (r=0,9998) [2]. Значения a и |b-1| не превышали доверительных интервалов своих неопределенностей (требование статистической незначимости), а ≤ t(95%, n-2) × sa (2,3 < 3,0) и |b-1| ≤ t(95%, n-2) × sb (1,5×10-4 < 2,4×10-2).
6
1
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20
0,25
0 2 4 6 8 10
А
Время, мин
ЦП
TX
без ПАВ
3
2
1
Рис. 2 Кинетические кривые реакции образования 3,3',5,5'-
тетраметилдифенохинондиимина в системе АСК - ТМБ - H2O2 в присутствии ПАВ. с
(ТМБ) = 1,6 × 10-3 моль/л, с (Н2О2) = 0,36 моль/л, с (ЦП) = с (ТХ) = 1,0 × 10-3 моль/л,
с(АСК) 10-5, моль/л, 1 = 3,2, 2 = 6,4, 3 = 13; Т = 293 К.
0,0
0,5
1,0
1,5
2,0
2,5
3,0
0 5 10 15 20
tgα, 10-2
c(АСК), 10-5, моль/л
∙∙∙∙ ЦП
― TX
--- без ПАВ
Рис. 3 Концентрационные зависимости скорости аналитической реакции ТМБ -
Н2О2 – АСК в присутствии и отсутствии (сплошная линия) ПАВ. с (ТМБ) = 2,4 × 10-3
моль/л, с (Н2О2) = 0,224 моль/л, с (ЦП) = с (ТХ) = 1,0 × 10-3 моль/л, Т = 293 К.
Также для нее была установлена точность (precision и accuracy) определения на трѐх
уровнях концентраций АСК. RSD ≤ 2,0%, (Табл. 2) что свидетельствует об
удовлетворительной воспроизводимости и точности полученных результатов.
Таблица 1 Данные регрессионного анализа
Параметр
Значение
Без ПАВ ЦП ТХ
Линейность,
(10-5, моль/л)
3,3 - 16,6 3,3 - 16,6 1,7 - 13,3
Уравнение
градуировочного
графика*
tg = 134,34[АСК] +
2×10-3
tg = 152,3[АСК] +
1×10-3
tg = 162,05[АСК] +
2×10-2
Sb 3,935 3,188 1,162
±tSb 10,925 8,850 3,225
Sa 2,0×10-3 3,5×10-4 9,5×10-5
±tSa 1,2×10-3 9,75×10-4 2,6×10-4
LOD (моль/л) 9,7×10-6 6,5×10-6 1,9×10-6
LOQ (моль/л) 3,3×10-5 2,2×10-5 6,2×10-6
* y = b×x + a
Таблица 2. Точность предложенной методики (n = 5, Р = 0,95)
Введено
(10-5, моль/л)
Найдено
( x ± Δ х )
% ± RSD δ (%)
3,30 3,35 ± 0,08 100,9 ± 2,0 0,9
6,60 6,67 ± 0,12 100,5 ± 1,5 0,5
10,00 9,88 ± 0,14 99,2 ± 1,1 -0,8
В таблице 3 приведены результаты определения АСК в двухкомпонентном
лекарственном препарате Кардиомагнил® (n = 5, Р = 0,95).
Таблица 3 Результаты определения АСК в препарате Кардиомагнил® (n = 5, Р = 0,95)
Заявленное содержание (мг) Найдено, х ± Δ х (мг) % ± RSD (%) δ (%)
75,8* 74,9 ± 1,8 98,9 ± 2,0 -1,07
* Содержание АСК установлено с помощью стандартной фармакопейной методики [3]
Литература:
1. Sweetman S.: Martindale: The complete drug reference. Pharmaceutical Press, London
2007.
2. ДФУ. – Х., 2001; ДФУ. Доповнення 1. – Х., 2004; ДФУ. Доповнення 2. –Х., 2008;
ДФУ. Доповнення 3. – Х., 2010.
3. British Pharmacopoeia, The Stationery Office on behalf of the Medicines and Healthcare
products Regulatory Agency, London 2009, P. 386–389
4. Wanga Y. Monitoring the hydrolyzation of aspirin during the dissolution testing for aspirin delayed-release tablets with a fiber-optic dissolution system / Y. Wanga, P. Xua et al. // J. Pharm. Anal. – 2012. – V.2, №5. – P. 386–389
5. Wang Z. Acetylsalicylic acid electrochemical sensor based on PATP–AuNPs modified molecularly imprinted polymer film / Z. Wang, H. Li, J. Chen et al. // Talanta. – 2011. – V.85, №3. – P. 1672–1679.
6. Reddy Y. Rapid simultaneous determination of aspirin and esomeprozole magnesium in combined tablets by validated ultra performance liquid chromatographic method / Y. Reddy, S. Reddy, M. Reddy, K. Mukkanti // J. Chem. Pharm. Res. − 2013. – Vol. 5, № 4. – P. 181–187
7. Campanella L. Kinetic investigation and predictive model for the isothermal degradation time in two commercial acetylsalicylic acid-based pharmaceutical tablet formulations / L. Campanella, V. Micieli, M. Tomassetti et al. // Thermochim. Acta. – 2011. – V.526, №1–2. – P. 151–156.
8. Shaw L. Simultaneous determination and pharmacokinetics of protein unbound aspirin and salicylic acid in rat blood and brain by microdialysis: An application to herbal–drug interaction / L. Shaw, T. Tsai // J. Chromatogr. B. – 2012. – V.895–896. – P.31–38.
9. Штыков С. Н. Мицеллярная тонкослойная хроматография: особенности и аналитические возможности / С. Н. Штыков, Е.Г.Сумина, Н.В Тюрина // Рос. хим. ж. – 2003. – Т. 57, №1. – с. 110-126
10. Issopoulos P.B. Micelle-assisted dissolution for the analysis of aspirin by second-order derivative potentiometry / P.B. Issopoulos // Fresenius J. Anal. Chem. – 1997. – Vol. 358. – P. 663-666
11. Блажеєвський М.Є. Кінетичне визначення аспірину / М.Є. Блажеєвський // Фармац. журнал. – 2004. – №3. – С. 65-72.
12. Экспериандова Л. П. Еще раз о пределах обнаружения и определения / Л. П. Экспериандова, К. Н. Беликов, С. В. Химченко, Т. А. Бланк // Журн. аналит. химии. – 2010. – Т. 65, № 3. – с. 229–234.
13. Josephy P Horseradish peroxidase oxidation / P. Josephy, T. Eling, R. Mason // J. Biol. Chem. – 1982. – Vol. 257, P. 3669-3675.
14. Блажеєвський М.Є. Кінетико-спектрофотометричне визначення спазмолітину / М.Є. Блажеєвський, Л.С. Криськів // Фармац. журнал. – 2012. – №6. –С. 67-73.
Комментарии: 5

Сметанина Екатерина Ивановна

интересный доклад

Yelena Sharachova

Хорошая аналитическая работа

Сметанина Екатерина Ивановна

интересная статья с позиций экспериментального анализа. развивайте ваши исследования дальше, получится неплохая экспериментальная часть научного исследования

Симонян Геворг Саркисович

Уважаемые Украинские коллеги- Николай Евстафьевич и Любомир отличная экспериментальная аналитическая работа. Вы пишите- В присутствии ПАВ в диапазоне 350 - 550 нм наблюдали батохромный сдвиг максимума полосы поглощения образующегося продукта реакции, что можно объяснить влиянием мицеллярной среды, однако нет объеснения механизма. Известно, что ацетилсалициловая кислота является гидротроп например для Triton X-100 а и Е-30. С уважением к.х.н. доцент Геворг Саркисович Симонян.

Блажеевский Николай Евстафьевич

Согласны с замечанием уважаемого Рецензента о проявлении гидротропных свойств ацетилсалициловой кислоты по отношению к неионным ПАВ, что проявляется в изменении стуктуры водной фазы и условий формирования фаз из растворов последних. Вместе с тем хотим отметить, что батохромные сдвиги максимума поглощения органических реагентов в растворах ПАВ обычно объясняются сменой полярного водного микроокружения на менее полярное органическое в мицеллярной фазе вследствие солюбилизации. Такие сдвиги обычно составляют 10-30 нм, что коррелирует с полученными результатами. Бóльшие сдвиги обычно сопряжены с изменением кислотно-основных характеристик регентов в мицеллярных растворах ПАВ и, как следствие, сменой формы существования реагентов...(См. Штыков С.Н. Ж. аналит. химии. 2002, Т. 57, № 10. - С.1018)
Комментарии: 5

Сметанина Екатерина Ивановна

интересный доклад

Yelena Sharachova

Хорошая аналитическая работа

Сметанина Екатерина Ивановна

интересная статья с позиций экспериментального анализа. развивайте ваши исследования дальше, получится неплохая экспериментальная часть научного исследования

Симонян Геворг Саркисович

Уважаемые Украинские коллеги- Николай Евстафьевич и Любомир отличная экспериментальная аналитическая работа. Вы пишите- В присутствии ПАВ в диапазоне 350 - 550 нм наблюдали батохромный сдвиг максимума полосы поглощения образующегося продукта реакции, что можно объяснить влиянием мицеллярной среды, однако нет объеснения механизма. Известно, что ацетилсалициловая кислота является гидротроп например для Triton X-100 а и Е-30. С уважением к.х.н. доцент Геворг Саркисович Симонян.

Блажеевский Николай Евстафьевич

Согласны с замечанием уважаемого Рецензента о проявлении гидротропных свойств ацетилсалициловой кислоты по отношению к неионным ПАВ, что проявляется в изменении стуктуры водной фазы и условий формирования фаз из растворов последних. Вместе с тем хотим отметить, что батохромные сдвиги максимума поглощения органических реагентов в растворах ПАВ обычно объясняются сменой полярного водного микроокружения на менее полярное органическое в мицеллярной фазе вследствие солюбилизации. Такие сдвиги обычно составляют 10-30 нм, что коррелирует с полученными результатами. Бóльшие сдвиги обычно сопряжены с изменением кислотно-основных характеристик регентов в мицеллярных растворах ПАВ и, как следствие, сменой формы существования реагентов...(См. Штыков С.Н. Ж. аналит. химии. 2002, Т. 57, № 10. - С.1018)
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.