facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip
Перевод страницы
 

ПРИМЕНЕНИЕ УСКОРЕННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ПРИ КАНДИДОЗЕ

ПРИМЕНЕНИЕ УСКОРЕННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ПРИ КАНДИДОЗЕПРИМЕНЕНИЕ УСКОРЕННЫХ МЕТОДОВ ДИАГНОСТИКИ ПРИ КАНДИДОЗЕ
Marku Diana, доктор медицинских наук, доцент

Марианна Калитка, ассистент

Молдавский Государственный Университет Медицины и Фармации им. Н.Тестемицану, Молдова

Участник первенства: Национальное первенство по научной аналитике - "Молдова";

Открытое Европейско-Азиатское первенство по научной аналитике;

В данной работе представлены результаты исследования в области методов диагностики кандидоза  слизистой полости рта .В выявлении  болезни ,её  осложнений  и лечении большая роль отведена методам лабораторных исследовании в частности микробиологическим.В этом плане была разработана селективная питательная среда для установления микробного пейзажа и ускоренной индикации грибов Candida albicans(MSD-Cand).

Ключевые слова: Candida albicans, MSD-Cand, кандидоз  слизистой полости рта.

Results of the research in the field of mucous oral cavity candidosis diagnostics methods are presented in this article. Major role in diagnostics of this illness, its complications and treatment is given to methods of laboratory researches, in particular, microbiological. In this context the selective nutrient medium for determination of microflora and accelerated indication of Candida albicans fungus (MSD-Cand) has been developed.

Keywords: Candida albicans, MSD-Cand, oral cavity candidosis.

 

В настоящее время  имеется довольно широкая гамма форм питательных сред (в виде пудры, жидких сред в флаконах, твердыхсредв пластинках) для выявления грибов рода Candida, которыереализуются под разными названиями в зависимости от производителя. Их недостаток состоит в том, что время выявления  грибов довольно длительное  (24-48 часов и более), являются дорогостоящимии  имеют небольшой срок годности.Исходя из этого,  целью исследования явилось  разработка  ускоренной диагностики кандидоза слизистой оболочки полости рта  посредством микробиологических методов. В этом плане нами была  разработана селективная, питательная среда  МSDCand. Она предназначена для выделения культуры, размножения и ускоренной идентификации грибов рода Candida albicans.

МSDCandпредставляет собой микрокристаллическую пленку, фиксированную на дне флакона с объемом  10мл.  В ее состав входит (см. рис. 1):

  • 1.Пептиновый бульон  20% - 2,5 мл;
  • 2.Глюкоза – 0,5гр;
  • 3.Ципринол (ципрофлоксацин) - 0,75мл;
  • 4.Раствор  красный фенол 1% - 1,0мл;
  • 5.Раствор  желатина 10% - 2,5мл;
  • 6. Среда №199,содержащая более 30 веществ – 2,5мл;
  • 7.Раствор  фосфатный буфер с рН 7,4-7,5 – 17,5мл.

Рис. 1. Метод изготовления MSD-Cand

Выявление грибов рода Candida посредством МSD Cand

Для идентификации присутствия грибов рода Candida в флаконе с микрокристаллической пленкой (3) помещается исследуемый материал (2) с 2 мл стерильной воды (1). Флакон необходимо взбалтывать в течении 2-3 минут для растворения, затем его помещают в термостате при  температуре  370 С до 9 часов (4). В случае наличия грибов рода Candida в исследуемом материале,  изначальный  красный цвет меняется в желтый (5). Это результат накапливания метаболических веществ, по мере роста и размножения грибов, которые способствуют снижению рН между 6,0-7,0. При отсутствии грибов рода Candida  в исследуемом материале изначальный красный цвет  среды не меняется (6) (см. рис. 2).

Рис. 2. Выявление грибов рода Candidaпосредством MSD-Cand

Полученные результаты показали, что время идентификации грибов с помощью МSDCand зависит от начальной концентрации зародышей в 1мл./гр. анализируемого материала. Определение 102 – 103 кол./мл./гр.  возможно через 8 – 9 часов с момента инкубации, а 1 млрд  и более кол./мл./гр. – через  3– 5 часов с момента инкубации.

Время определения грибов Candida c MSD-Cand в зависимости от концентрации микроорганизмов в исследуемом материале.

концентрация
микроорганизов
в мл/гр

Время определения  (часы)

1

2

3

4

5

6

7

8

9

24

10 1

-

-

-

-

-

-

-

-

+

+++

10 2

-

-

-

-

-

-

-

-

+

+++

10 3

-

-

-

-

-

-

-

+

++

+++

104

-

-

-

-

-

-

+

++

+++

+++

105

-

-

-

-

-

+

++

+++

+++

+++

106

-

-

-

-

+

++

+++

+++

+++

+++

107

-

-

-

+

++

+++

+++

+++

+++

+++

108

-

-

+

++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

109

+

++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

Примечание:

  • „+++”- выраженный положительный результат (желтый цвет) 
  • „++”-положительный результат (желтый цвет/оранжевый цвет)
  • „+”-невыраженный положительный результат (оранжевый цвет)
  • “-” - отрицательный результат (красный цвет).

Для определения селективности МSDCand были проведены 103 опыта с Candida albicansв ассоциации с другими микроорганизмами. Результаты показали, что МSD Cand имеет избирательные способности к Candida albicansв зависимости от ассоциированных микроорганизмов. Так, в ассоциации с S-faeciumCandida-аlbicans определяется уже через 3 часа; с S-aureusи с S-pyogenesчерез 6 часов, а в других ассоциациях,через более 9 часов. В целях определения чувствительности МSDCand было произведено 98 опытов с 7 видами штаммов грибов рода Candida. В результате было установлено, чтоМSD Cand обладает более высокой чувствительностью в сравнении с классическим методом. Он позволяет выявить наличие грибов рода Candida в течение 9 часов с момента забора и посева патологического материала при t–370C в концентрации 103 кол./мл. – в 78,5% случаев, при концентрации 104 кол./мл. – в 93,8% случаев, а при 105 кол./мл. – в 100% случае.

Выводы

1. Pазработана селективная, питательная среда МSD – Cand в виде микрокристаллической пленки, которая позволяет определить наличие грибов в течении 9 часов в зависимости от их первоначальной концентрации в 1 мл. исследуемого материала;

2. Cреда МSD – Cand чувствительна и обладает избирательной способностью по отношению к грибам рода Candida.

3. Характеризуется МSD – Cand экономичностью, простотой применения и доступностью для стоматологических кабинетов всех уровней. Срок ее хранения один год при комнатной температуре.

 

Литература:

  1. Anghel R. Perfecţionarea metodelor rapide de identificare a corinebacteriilor patogene: Autoref. tezei dr. şt. med.: Chişinău, 2002.
  2. Банченко Г. В.,Максимовский Ю. М., Гринин В. М. Язык –„зеркало” организма.- Москва, 2000.
  3. Боровский Е. В., Машкиллейсон А. Л. Заболевания слизистой оболочки полости рта и губ. Москва, 2001.
  4. Бурова С. А., Курбатова И. В. Диагностика опортунистической и кандидозной инфекции.// Клиническая лабораторная диагностика. 2000. №8. с. 41-43.
  5. Данилевский Н. Ф., Леонтьев В. К., Несин А. Ф., Рахний Ж. И. Заболевания слизистой оболочки полости рта. Москва, 2001.
  6. Сергеев А. Ю., Сергеев Ю. В. Кандидоз (природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика и лечение). Москва, 2001.
  7. Euzeby J. Mycologie medicale comparee; Tome II.- Lyon, 1994.
  8. Grimaudo N. J., Nesbitt W. E. :Coaggregation of Candida albicans with oral Fusobacterium species. Oral Microbiol Immunol 1997; 12(3).
0
Ваша оценка: Нет Средняя: 6.4 (12 голосов)
Комментарии: 11

Голованова Ирина

УважаемаяMarku Diana! Какие статистические методы обработки были использованы для доказательства эффективности данной среды, чтобы можно его было широко использовать в стоматологии? Спасибо. С уважением Ирина Голованова

Лахтин Юрий Владимирович

Уважаемые авторы! Вопросы своевременной идентификации грибов рода Кандида имеют важное значение для клинической медицины. По разным данным носительство грибов Candida albians составляет около 50%. Вопросы диагностики участия грибов в развитии заболеваний очень трудны и неоднозначны. Для установления кандидоза как нозологии принято считать не столько количество выявленных колоний гриба, сколько рост числа колоний в динамике заболевания. Скажите, пожалуйста, как согласуются результаты вашего исследования с теми референтными значениями, принятыми для бактериологического метода (на среде Сабуро кол-во колоний/мл)? С уважением, Лахтин Ю.В.

Горчаков Владимир Николаевич

Кандидоз - заболевание трудно диагностируемое и трудно поддающееся лечение. Важно, что появляются работы, которые по небольшому количеству содержимого могут идентифицировать грибы. Результат имеет практическое значение. С уважением Горчаков В.Н.

Марку Диана Дмитриевна

уважаемый Горчаков В.Н, кандидоз действительно требует большое количество времени при диагностики, для создания комфорта пациента и минимум экономичности был разработан данный метод доступный для стоматологических кабинетов.Огромное спасибо за Вашу поддержку.

Вашадзе Шорена Владимировна

В данной работе представленные результаты исследования в области методов диагностики кандидоза слизистой полости рта выявление болезни её осложнений и лечение очень актуальная и интересная тема. спасибо за работу. С уважением Шорена Вашадзе.

Кулиева Рена Гейдаровна

Уважаемые авторы! Тема очень актуальная.Кандидоз - заболевание распространенное повсеместно и как известно, C.albicans по наличию факторов патогенности превосходит прочие виды Candida.Насколько приемлема данная методика для диагностики кандидозов кожи , ногтей , кишечника и т. д. С уважением Гулиева Рена.

Марку Диана Дмитриевна

Уважаемая Гулиева Рена , нами разработанный метод был апробирован только в области стоматологии, так как мы являемся сотрудниками кафедры терапевтической стоматологии. Спасибо за коментарий.

Рудень Василь Володимирович

Уважаемая Marku Diana! Представленный Вами доклад актуальный и по результатам и по содержанию. Но вместе с тем вопросы: как часто врачи-стоматологи прибегают к микробиологическим исследованием при диагностике кандидоза слизистой полости рта? Кто, по Вашему мнению, занимается в стоматологических кабинетах этой диагностикой? Спасибо! С уважением проф. Василий Рудень

Марку Диана Дмитриевна

Уважаемый проф. Василий Рудень,каждый случай кандидоза слизистой оболочки полости рта обследуется клинически и в обЪязательном порядке определяется микробиологическими исследованиями.В стоматологических кабинетах каждому врачу стоматологу доступен данный метод, так как он экономичен и прост в применении. Огромное спасибо Марку Диана.

Григоренко Любовь Викторовна

Многоуважаемые авторы! Ваше научное исследование очень интересное и многогранное. Можно ли использовать ускоренную диагностику кандидоза при исследовании например питьевой воды из колодцев, или бутилированной питьевой воды. Где можно приобрести разработанную вами питательную среду. С уважением Григоренко любовь

Чиглинцев Александр Юльевич

Уважаемые авторы. Согласно приведенной вами таблице, через 24 час инкубации имелся выраженный положительный результат, оцениваемый качественно. Количественно этот результат был и в клинически не значимом и в клинически значимом диапазоне, тогда что это может дать для стоматологов. С уважением Чиглинцев А.Ю.
Комментарии: 11

Голованова Ирина

УважаемаяMarku Diana! Какие статистические методы обработки были использованы для доказательства эффективности данной среды, чтобы можно его было широко использовать в стоматологии? Спасибо. С уважением Ирина Голованова

Лахтин Юрий Владимирович

Уважаемые авторы! Вопросы своевременной идентификации грибов рода Кандида имеют важное значение для клинической медицины. По разным данным носительство грибов Candida albians составляет около 50%. Вопросы диагностики участия грибов в развитии заболеваний очень трудны и неоднозначны. Для установления кандидоза как нозологии принято считать не столько количество выявленных колоний гриба, сколько рост числа колоний в динамике заболевания. Скажите, пожалуйста, как согласуются результаты вашего исследования с теми референтными значениями, принятыми для бактериологического метода (на среде Сабуро кол-во колоний/мл)? С уважением, Лахтин Ю.В.

Горчаков Владимир Николаевич

Кандидоз - заболевание трудно диагностируемое и трудно поддающееся лечение. Важно, что появляются работы, которые по небольшому количеству содержимого могут идентифицировать грибы. Результат имеет практическое значение. С уважением Горчаков В.Н.

Марку Диана Дмитриевна

уважаемый Горчаков В.Н, кандидоз действительно требует большое количество времени при диагностики, для создания комфорта пациента и минимум экономичности был разработан данный метод доступный для стоматологических кабинетов.Огромное спасибо за Вашу поддержку.

Вашадзе Шорена Владимировна

В данной работе представленные результаты исследования в области методов диагностики кандидоза слизистой полости рта выявление болезни её осложнений и лечение очень актуальная и интересная тема. спасибо за работу. С уважением Шорена Вашадзе.

Кулиева Рена Гейдаровна

Уважаемые авторы! Тема очень актуальная.Кандидоз - заболевание распространенное повсеместно и как известно, C.albicans по наличию факторов патогенности превосходит прочие виды Candida.Насколько приемлема данная методика для диагностики кандидозов кожи , ногтей , кишечника и т. д. С уважением Гулиева Рена.

Марку Диана Дмитриевна

Уважаемая Гулиева Рена , нами разработанный метод был апробирован только в области стоматологии, так как мы являемся сотрудниками кафедры терапевтической стоматологии. Спасибо за коментарий.

Рудень Василь Володимирович

Уважаемая Marku Diana! Представленный Вами доклад актуальный и по результатам и по содержанию. Но вместе с тем вопросы: как часто врачи-стоматологи прибегают к микробиологическим исследованием при диагностике кандидоза слизистой полости рта? Кто, по Вашему мнению, занимается в стоматологических кабинетах этой диагностикой? Спасибо! С уважением проф. Василий Рудень

Марку Диана Дмитриевна

Уважаемый проф. Василий Рудень,каждый случай кандидоза слизистой оболочки полости рта обследуется клинически и в обЪязательном порядке определяется микробиологическими исследованиями.В стоматологических кабинетах каждому врачу стоматологу доступен данный метод, так как он экономичен и прост в применении. Огромное спасибо Марку Диана.

Григоренко Любовь Викторовна

Многоуважаемые авторы! Ваше научное исследование очень интересное и многогранное. Можно ли использовать ускоренную диагностику кандидоза при исследовании например питьевой воды из колодцев, или бутилированной питьевой воды. Где можно приобрести разработанную вами питательную среду. С уважением Григоренко любовь

Чиглинцев Александр Юльевич

Уважаемые авторы. Согласно приведенной вами таблице, через 24 час инкубации имелся выраженный положительный результат, оцениваемый качественно. Количественно этот результат был и в клинически не значимом и в клинически значимом диапазоне, тогда что это может дать для стоматологов. С уважением Чиглинцев А.Ю.
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.