facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip
Перевод страницы
 

Структурная и ультраструктурная организация лимфатических узлов диких свиней при африканской чуме свиней (экспериментальное исследование)

Структурная и ультраструктурная организация лимфатических узлов диких свиней при африканской чуме свиней (экспериментальное исследование)
Elena Valerievna Ryzhova, старший преподаватель, кандидат ветеринарных наук

Пронин Валерий Васильевич, заведующий кафедрой, доктор биологических наук, профессор

Ивановская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.К.Беляева, Россия

Колбасов Денис Владимирович, директор, доктор ветеринарных наук, профессор

Белянин Сергей Александрович, младший научный сотрудник

Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии, Россия

Участник первенства: Национальное первенство по научной аналитике - "Россия";

Открытое Европейско-Азиатское первенство по научной аналитике;

УДК: 619:616.98:578.833.314

В статье представлены данные по структурной и ультраструктурной организации органов иммунной системы (лимфатические узлы) у диких свиней при экспериментальном воспроизведении африканской чумы свиней (АЧС) высоковирулентным полевым изолятом вируса АЧС второго генотипа, который циркулирует на территории России.

Ключевые слова: африканская чума свиней, дикие свиньи (кабаны), вирус второго генотипа, структурная и ультраструктурная организация органов иммунной системы (лимфатические узлы).

The article presents data from the  structural and ultrastructuralthe organization of the organs of the immune system (lymph nodes) from the experimental reproduction of african swine fever (ASF) in wild pigs, infected with highly virulent field isolate of the ASF second genotype virus, which circulate on the territory of the Russian Federation.

Keywords:Аfrican Swine Fever, wild pigs (boars),virus genotype of the second,structural and ultrastructural organization of organs of the immune system (lymph nodes).

 

Африканская чума свиней (АЧС), так же известная, как африканская лихорадка, болезнь Монтгомери – это легко передающаяся вирусная болезнь домашних и диких  свиней. Согласно Международной классификации заразных болезней животных (OIE), данная болезнь относится к списку А, протекает в форме эпизоотии, при которой болезнь способна к широкому распространению, охватывающему все поголовье свиней хозяйства, района, области, страны, что приводит к огромному экономическому ущербу в  сельском хозяйстве.

Впервые африканская чума свиней зарегистрирована в 1903 году в Южной Африке. В середине прошлого века она была занесена с Черного континента в страны Европы, затем попала в Советский Союз. Тогда очаги заражения удалось быстро ликвидировать. В настоящее время  для Российской Федерации  эпизоотическая  ситуация по АЧС  более критичная и напряженная [1,2,3].

Первые вспышки африканской чумы свиней в России были отмечены в конце 2007 года в Шатойском районе Чечни. Затем чума охватила Южный, Северо-Кавказский федеральные округа и продолжала продвигаться на север. С 2007 года АЧС зарегистрирована на территории 24 субъектов РФ, в стране выявлено около 254 неблагополучных пунктов и 37 инфицированных вирусом объектов. При ликвидации очагов АЧС уничтожено более 440 тысяч голов свиней[2,3].

Анализ источников распространения АЧС показал, что основную роль в продвижении болезни играют два фактора: распространение заболевания в популяции диких свиней и пищевые отходы, скармливаемые свиньям. Наибольшую опасность в распространении АЧС представляет миграция диких  свиней (кабанов), т.к. для диких животных не существует границ  между регионами и   невозможен постоянный контроль популяций диких животных[1].

С точки зрения патогенеза заболевания, при АЧС первичная репликация вируса происходит в моноцитах и макрофагах лимфатических узлов, расположенных недалеко от места проникновения вируса. Вначале вирус инфицирует моноциты и макрофаги миндалин, нижнечелюстных, околоушных и мезентериальных лимфатических узлов, затем с кровью и лимфой распространяется во вторичные места репликации – селезенку, костный мозг, лимфатические узлы, легкие, печень и почки – и вызывает дистрофические и некротические изменения в этих органах.  Независимо от путей проникновения вируса, постоянно отмечаются изменения в селезенке и лимфатических узлах желудка, печени, почек[2,3,4].

Цель исследования.

Выявить основные особенности структурной и ультраструктурной организации лимфатических узлов при заражении диких свиней высоковирулентным полевым изолятом вируса АЧС второго генотипа, который циркулирует на территории РФ.

Материалы и методы.

1. Дикие свиньи европейского подвида живой массой 40-50 кг. – 4 животных, получены из национального парка «Завидово» Тверской области Российской Федерации.

2. Изолят вируса АЧС №154/20, выделенный в 2009 г. от павшего кабана в ст. Калиновская, Наурского района Республики Чечня с инфекционной активностью 6,0 lgГАЕ50/см3.Данный изолят вируса паспортизирован и внастоящее время его используют в ГНУ ВНИИВВиМ  Россельхозакадемии, г. Покров при проведении фундаментальных и прикладных НИОКР.

3. Моноклональные антитела Ki– 67 (фирма «DAKO»).

Одного кабана (№1) инфицировали внутримышечно изолятом вируса АЧС №154/20 (экстрактом 10%-ной суспензии селезенки) в объеме 2 см3. Остальные животные (№№2,3,4) находились в одном боксе на контакте с внутримышечно инфицированным кабаном (№1).

В течение эксперимента ежедневно проводили клинический осмотр животных. Для гистологического и иммуногистохимического исследований  отбирали пробы  соматических (нижнечелюстных и предлопаточных), а также висцеральных (портальных, желудочных и почечных) лимфатических узлов. Весь отобранный материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, уплотняли в парафине, изготавливалисрезы толщиной 4 – 5 мкм на роторном микротоме.

Для гистологического исследования препараты окрашивали гематоксилином и эозином, изучали под микроскопом LeicaDM1000, микрофотографирование осуществляли с помощью цифрового аппаратаLeicaDMB.

Иммуногистохимическое  исследование (определение пролиферативной активности клеток – В- лимфоцитов во вторичных фолликулах лимфатических узлов) проводили с помощью иммунопероксидазного метода на  срезах лимфатических узлов (толщиной 4-5 мкм) с использованием молекулярного биомаркера Ki 67(DAKO), который является показателем пролиферативной активностиклеток и идентифицирует ядерный антиген, присутствующий на всех стадиях клеточного цикла, кроме G0. Пролиферативную активность В-лимфоцитов во вторичных лимфатических фолликулах лимфатических узлов оценивали по индексу пролиферации (ИП,%), который представляет собой долю Ki-67-позитивных клеток в общей популяции клеток вторичных лимфатических фолликулов лимфатических узлов, при подсчете 100 клеток в 10 рандомизированных полях зрения по методике Г.Г. Автандилова

Результаты иммуногистохимического исследования обрабатывали статистически с применением программного   комплекса MicrosoftExel7.

Для электронной микроскопии материал после фиксации: 1) промывали в 0,1 М фосфатном буфере рН 7,0 -15минут; 2) постфиксировали в 1% OsO4 на том же буфере – 90минут;3) промывали в 0,1 М фосфатном буфере рН 7,0 -15минут; 4) Обезвоживание в батарее спиртов: 30, 50, 70% - 2х10минут.

Схема обезвоживания:

Сканирующая микроскопия

Трансмиссионная микроскопия

Обезвоживание в 70% – 1х10мин

Обезвоживание в 70% – 1х10мин

80,90,96% – 2х10мин

100 – 2х15

80,90,96% – 2х10мин

100% – 2х15

абс. спирт+абс. ацетон 2х15 мин

абс. спирт+абс. ацетон 2х15 мин

абс. ацетон – 2х 15 мин

абс. ацетон – 2х 15 мин

Высушивание методом критической точки (на установке Hitachi HCP-2 (Япония)).

Смола (смесь Эпона и Аралдита):абс. ацетоном (1:2) – 18-24 часа

Монтаж объектов на столики

Смола (смесь Эпона и Аралдита):абс. ацетоном (1:1) – 24 часа

Напыление золотом (на установке Eiko– IB– 3 (Eiko– Япония)).

Смола (смесь Эпона и Аралдита):абс. ацетоном (2:1) – 18-24 часа

Просмотр препаратов на сканирующем (растровом)  электронном микроскопе JSM– 6510 LV(JEOL(Япония)).

Смола (смесь Эпона и Аралдита) – 1 час с открытыми пробками – для удаления остатков ацетона

 

Заливка в такую же смесь смолы в капсулы

 

Полимеризация при 45?С – 24 часа

 

Полимеризация при 60?С – 48-72 часа

 

Приготовление ультратонких срезов  200-300?

 

Контрастирование срезов 1% водными растворами уранилацетата и цитрата свинца

 

Просмотр препаратов на просвечивающем электронном микроскопе JEM1011 (JEOL(Япония)) (диапазон увеличения - от х50 до х1 000 000).

 

Результаты исследования.

Гибель животного №1 наступила на 5-е сутки, животных №№2,3,4  - 10-е сутки.

Лимфатические узлы. При гистологическом исследовании  в лимфатических узлах животных  наблюдаются лимфатические фолликулы с центрами размножения (рис.1а), однако в отдельных фолликулах отмечается преобладание процессов кариопикноза и кариорексиса  лимфоцитов (рис.1б). Кроме этого,  в лимфатических узлах встречаются участки с гиперплазией фолликулов, что можно рассматривать как компенсаторную реакцию. В отдельных лимфатических узлах выявлен склероз краевых синусов, лимфоцитарная  инфильтрация капсулы. В перинодальной клетчатке имеются образования, состоящие из переполненных кровью кавернозных полостей с утолщенными стенками.При иммуногистохимическом исследовании пролиферативной активности клеток в лимфатических узлах выявлен антиген Ki– 67, что представлено в виде коричневого окрашивания ядер клеток. Наиболее отчетливо зона пролиферации клеток отмечается в лимфоидных фолликулах в центре размножения (рис.2а).

По результатам статистической обработки индекс пролиферации (ИП, %) в лимфатических узлах у диких свиней (кабанов) составил (рис.2б):1) Нижнечелюстные лимфатические узлы: 15±0,4%; 2) Портальные лимфатические узлы: 8±0,4%; 3) Желудочные лимфатические узлы: 8±0,8%; 4) Почечныелимфатическиеузлы: 5,5±1,3%.

                    

Рис. 1. Желудочный лимфатический узел: а) 1. гиперплазия фолликулов; 2. центры размножения (об.20 х ок.15; окраска гематоксилином и эозином); б) фолликулы без центров размножения (об.20 х ок.15; окраска гематоксилином и эозином).

Рис. 2а. Желудочный лимфатический узел:Экспрессия маркера пролиферации
Ki-67 (об.20 х ок. 15; иммунопероксидазный метод окраски)

Рис.2б. Индекс пролиферации ( ИП,%) В- лимфоцитов в лимфатических узлах:1.Нижнечелюстные лиматические узлы; 2.Портальные лимфатические узлы; 3. Околожелудочные лимфатические узлы; 4. Почечные лимфатические узлы

Снижение уровня пролиферации В- лимфоцитов, приводит к тому, что в ультраструктуре четко прослеживается «разрежение» лифоидной ткани, за счет снижения количества лимфоцитов (рис.3а, 3б).

                          

Рис. 3. Желудочный лимфатический узел: а) на 5 сутки после заражения (сканирующая (растровая) электронная микроскопия, ув.× 850, 20мкм) б). на 10 сутки после заражения (сканирующая (растровая) электронная микроскопия, ув.× 2,500, 10мкм.

Уменьшение количества лимфоцитов связано с апоптозом лимфоидных клеток, в результате чего наблюдается уменьшение клеток в размерах, уплотнение цитоплазмы, конденсация хроматина по периферии, под мембраной ядра располагаются четко очерченные плотные массы различной формы и размеров (рис.4а), а так же наличие апоптозных телец (рис.4б).

                          

Рис.4. Желудочный лимфатический узел: а) апоптоз (конденсация хроматина, уплотнение цитоплазмы) (трансмиссионная микроскопия, 1мкм) б) апоптозное тельце (трансмиссионная микроскопия), 1мкм.

Несмотря на апоптоз лимфоидный клеток, полное ингибирование процессов пролиферации лимфоцитов не происходит, о чем свидетельствует наличие на фонеклеток, которые подверглись апоптозу и активных лимфоцитов, а так же плазматических клеток (рис.5а, 5б).

                     

Рис.5. Желудочный лимфатический узел: а) общий вид клеток (лимфоциты) (трансмиссионная микроскопия) 10мкм); б) общий вид клеток (плазматические клетки) (трансмиссионная микроскопия) 5мкм.

Выводы.

В лимфатических узлах у диких свиней (кабанов) наблюдается, как гиперплазия фолликулов, с наличием центров размножения, так и редукция фолликулов, сочетающаяся с кариопикнозом и кариорексисом лимфоцитов. При иммуногистохимическом исследовании отмечается динамическое уменьшение процесса пролиферации В – лимфоцитов. В ультраструктуре лимфатических узлов прослеживается «разрежение» лифоидной ткани, за счет снижения количества лимфоцитов, подвергшихся апоптозу, однако полное ингибирование процессов пролиферации не происходит, что объясняется наличием активных лимфоцитов и плазматических клеток.

Литература:

  1. Белянин, С.А. Патогенность вируса африканской чумы свиней, циркулирующего на территории РФ / С.А. Белянин, А.П. Васильев, Д.В. Колбасов  и др. // Роль ветеринарной науки в реализации продовольственной доктрины РФ: материалы Международной научно-практической конференции/ ГНУ ВНИИВВиМ.-Покров, 2011.-С.14-20.
  2. Макаров, В.В. и др. Дикий европейский кабан. Ветеринарная биология и эпизоотология //Ветеринария. – 2010. - №7. – С.28-31.
  3. Макаров В.В. Африканская чума свиней. М.: Российский университет дружбы народов. 2011, 268с.
  4. Серов, В.В. Патологическая анатомия. Атлас / В.В. Серов, Н.Е. Ярыгин, В.С. Пауков. «Медицина», Москва, 1986 год, 185 с.
0
Ваша оценка: Нет Средняя: 7.6 (5 голосов)
Комментарии: 6

Телепнева Людмила Георгиевна

Уважаемая Елена Валерьевна! Давно не видела таких прекрасных иллюстраций апоптоза, несмотря на то, что с его проявлениями пришлось познакомиться более двух десятилетий тому назад, еще до изучения мною проблем, связанных с ВИЧ-инфекцией. Своими талантливо и тщательно продуманными экспериментами Вы, в очередной раз, подтвердили, что болезнь, вызванная патогеном, для которого клетками-мишенями являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов (моноциты крови, а также макрофаги), обязательно сопровождаются специфическим нарушением лимфатических узлов. Действительно, как и при ВИЧ-инфекции, при африканской чуме свиней, снижение количества В-лимфоцитов является следствием заболевания, поскольку разрушение макрофагов всегда сопровождается высвобождением цитокинов и фактора некроза опухолей, индуцирующих апоптоз сначала Т- клеток, а потом и В– клеток. Помимо этого, объединяют две эти инфекции и тот факт, что их возбудители – представители Царства Вира. Это - вирус семейства Asfarviridae, рода Asfivirus; (единственный в роду и семействе, по номенклатуре 2000 г.) имеющий размер вириона икосаэдрической формы 175—215 нм. и содержащий двунитчатую молекулу ДНК, состоящую из 170-190 тыс пар нуклеотидов. Зрелые вирионы вируса иммунодефицита человека имеют сферическую форму, их размеры не превышают 100-120 им в диаметре. Геном вируса иммунодефицита человека образуют две нити +РНК; связанные друг с другом при помощи двух белков: рб и р7. В этой связи обращаю внимание на тот факт, что вирусемия – циркуляция вируса в крови, связанная с размножением вирусов во внутренних органах и их выходом из разрушенных или поврежденных клеток, обнаруживается при многих вирусных инфекциях, в том числе и при названных мною заболеваниях. Вместе с тем, при попадании в кровь и возникновении вирусемии, являющейся необходимым условием эпидемического распространения возбудителей при трансмиссивных инфекциях, велика вероятность контакта возбудителей этих заболеваний именно с эритроцитами - самой многочисленной и долгоживущей популяцией клеток крови. Так, известно, что в организме здорового человека находится 2,Зх1013 эритроцитов, что в сотни раз больше, чем количество лейкоцитов, а площадь поверхности всех эритроцитов составляет 3800 м2, что в 2000 раз превышает поверхность тела взрослого человека. Попутно замечу, что скорость движения эритроцитов по кровеносной системе позволяет им совершать один кругооборот по сосудистой системе человека за 50 секунд. Благодаря этим обстоятельствам потенциальные возможности эритроцитов для взаимодействия с микробами, попавшими в кровеносное русло, очень велики. Помимо этого, параллельная закладка тканей и органов с кровеносной системой, способна привести к тому, что эти клеточные территории организма будут в дальнейшем обслуживаться не только тканевыми макрофагими, но и их тканевыми эритроцитами - единственными клетками крови, лишенными не только ядра, но и части других клеточных составляющих. В силу этих предположений интересно было бы исследовать, чем же отличаются фрагменты эритроцитов, поглощенных макрофагами в исследуемых Вами лимфоузлах, расположенных в разных участках организма свиней. Ваша работа в этом направлении могла бы экспериментально подтвердить не только данное и давнее предположение харьковских и винницких медиков, но и эритроцитарную теорию развития ракового процесса, которую поддерживаю (благодаря чему и отыскала совсем недавно в недрах Интернета). Довожу до Вашего сведения краткие данные об её авторе. Это - отличный хирург, онколог и трансфузиолог Жогов Владимир Алексеевич docto.rzogov@mail.ru. Сейчас его предположение отвергают, заявляя, что «отношение эритроцитов к возникновению ракового заболевания опровергается самой природой. Существует достаточно случаев возникновения рака в отсутствии кровеносной системы. Именно на этом строилась одна из первых классических раковых теорий – гипотеза Варбурга». Однако, по моему глубокому убеждению, текст цитаты (теперь уже второй по счету): «Рак, в отличие от других заболеваний, имеет бесчисленное множество вторичных причин возникновения. Но, даже для рака, есть всего одна основная причина. Иначе говоря, основная причина рака — это замена дыхания с использованием кислорода в теле нормальной клетки на другой тип энергетики — ферментацию глюкозы», как раз то и свидетельствует об усилении метаболизма в раковой клетке в случае появления у нее дополнительных тканевых маркеров, т. е. противоречит выделенным мною жирным шрифтом умопостроениям первой цитаты. Конечно. цитата, тем более взятая из текста ученого, трудам которого доверяешь, вещь, хорошая, но и чтение всего текста, из которого она взята, тоже лишним никогда не оказывается. Поэтому сообщаю вам, что вторая по счету цитата была позаимствована мною из текста лекции «The Prime Cause and Prevention of Cancer - Part 1 with two prefaces on prevention», прочитанной 30 июня 1966 года Нобелевским лауреатом, Отто Варбургом. А выделила в ней часть текста наклонным шрифтом намеренно, поскольку эритроциты и были то востребованы природой именно для выноса с помощью кислорода молекул неорганических элементов, в частности – молекул углерода и азота, образующихся в результате использования клеткой органики. Об этом природном обстоятельстве бесстрастно свидетельствуют такие вещества, как СО2, СО и NO, которые активнее, чем кислород, связывающиеся с главным веществом эритроцитов - гемоглобином. Если вас заинтересует данная проблема, обратите более пристальное внимание и на следующие дветцитаты: 1. К тому же, и сам «Варбург игнорировал фундаментальный биохимический аспект раковой проблемы, а именно механизмы, ответственные за контролируемый рост нормальных клеток, которые утрачены в раковых клетках. Несомненно, различия в энергетическом обмене, открытые Варбургом, важны, однако, будучи таковыми, они находятся на уровне биохимической организации клетки и недостаточно глубоки, чтобы касаться сердцевины проблемы рака, неконтролируемого роста». 2. «Первичная причина рака» Варбурга — замена дыхания гликолизом — может быть лишь симптомом истинной первичной причины, однако не является таковой сама по себе. Первичную причину следует искать на уровне контроля генной экспрессии, детали которой пока не известны. Таково, в частности, мнение лауреата Нобелевской премии и в прошлом — коллеги Варбурга по работе Н. Kjebs (1972)». Данные цитаты взяты мною уже из книги Сейц И.Ф., Князев П.Г. Молекулярная онкология. - М.: Медицина, 1986. - 353 с. С наилучшими пожеланиями Телепнева Людмила Георгиевна

Телепнева Людмила Георгиевна

Уважаемая Елена Валерьевна! Давно не видела таких прекрасных иллюстраций апоптоза, несмотря на то, что с его проявлениями пришлось познакомиться более двух десятилетий тому назад, еще до изучения мною проблем, связанных с ВИЧ-инфекцией. Своими талантливо и тщательно продуманными экспериментами Вы, в очередной раз, подтвердили, что болезнь, вызванная патогеном, для которого клетками-мишенями являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов (моноциты крови, а также макрофаги), обязательно сопровождаются специфическим нарушением лимфатических узлов. Действительно, как и при ВИЧ-инфекции, при африканской чуме свиней, снижение количества В-лимфоцитов является следствием заболевания, поскольку разрушение макрофагов всегда сопровождается высвобождением цитокинов и фактора некроза опухолей, индуцирующих апоптоз сначала Т- клеток, а потом и В– клеток. Помимо этого, объединяют две эти инфекции и тот факт, что их возбудители – представители Царства Вира. Это - вирус семейства Asfarviridae, рода Asfivirus; (единственный в роду и семействе, по номенклатуре 2000 г.) имеющий размер вириона икосаэдрической формы 175—215 нм. и содержащий двунитчатую молекулу ДНК, состоящую из 170-190 тыс пар нуклеотидов. Зрелые вирионы вируса иммунодефицита человека имеют сферическую форму, их размеры не превышают 100-120 им в диаметре. Геном вируса иммунодефицита человека образуют две нити +РНК; связанные друг с другом при помощи двух белков: рб и р7. В этой связи обращаю внимание на тот факт, что вирусемия – циркуляция вируса в крови, связанная с размножением вирусов во внутренних органах и их выходом из разрушенных или поврежденных клеток, обнаруживается при многих вирусных инфекциях, в том числе и при названных мною заболеваниях. Вместе с тем, при попадании в кровь и возникновении вирусемии, являющейся необходимым условием эпидемического распространения возбудителей при трансмиссивных инфекциях, велика вероятность контакта возбудителей этих заболеваний именно с эритроцитами - самой многочисленной и долгоживущей популяцией клеток крови. Так, известно, что в организме здорового человека находится 2,Зх1013 эритроцитов, что в сотни раз больше, чем количество лейкоцитов, а площадь поверхности всех эритроцитов составляет 3800 м2, что в 2000 раз превышает поверхность тела взрослого человека. Попутно замечу, что скорость движения эритроцитов по кровеносной системе позволяет им совершать один кругооборот по сосудистой системе человека за 50 секунд. Благодаря этим обстоятельствам потенциальные возможности эритроцитов для взаимодействия с микробами, попавшими в кровеносное русло, очень велики. Помимо этого, параллельная закладка тканей и органов с кровеносной системой, способна привести к тому, что эти клеточные территории организма будут в дальнейшем обслуживаться не только тканевыми макрофагими, но и их тканевыми эритроцитами - единственными клетками крови, лишенными не только ядра, но и части других клеточных составляющих. В силу этих предположений интересно было бы исследовать, чем же отличаются фрагменты эритроцитов, поглощенных макрофагами в исследуемых Вами лимфоузлах, расположенных в разных участках организма свиней. Ваша работа в этом направлении могла бы экспериментально подтвердить не только данное и давнее предположение харьковских и винницких медиков, но и эритроцитарную теорию развития ракового процесса, которую поддерживаю (благодаря чему и отыскала совсем недавно в недрах Интернета). Довожу до Вашего сведения краткие данные об её авторе. Это - отличный хирург, онколог и трансфузиолог Жогов Владимир Алексеевич docto.rzogov@mail.ru. Сейчас его предположение отвергают, заявляя, что «отношение эритроцитов к возникновению ракового заболевания опровергается самой природой. Существует достаточно случаев возникновения рака в отсутствии кровеносной системы. Именно на этом строилась одна из первых классических раковых теорий – гипотеза Варбурга». Однако, по моему глубокому убеждению, текст цитаты (теперь уже второй по счету): «Рак, в отличие от других заболеваний, имеет бесчисленное множество вторичных причин возникновения. Но, даже для рака, есть всего одна основная причина. Иначе говоря, основная причина рака — это замена дыхания с использованием кислорода в теле нормальной клетки на другой тип энергетики — ферментацию глюкозы», как раз то и свидетельствует об усилении метаболизма в раковой клетке в случае появления у нее дополнительных тканевых маркеров, т. е. противоречит выделенным мною жирным шрифтом умопостроениям первой цитаты. Конечно. цитата, тем более взятая из текста ученого, трудам которого доверяешь, вещь, хорошая, но и чтение всего текста, из которого она взята, тоже лишним никогда не оказывается. Поэтому сообщаю вам, что вторая по счету цитата была позаимствована мною из текста лекции «The Prime Cause and Prevention of Cancer - Part 1 with two prefaces on prevention», прочитанной 30 июня 1966 года Нобелевским лауреатом, Отто Варбургом. А выделила в ней часть текста наклонным шрифтом намеренно, поскольку эритроциты и были то востребованы природой именно для выноса с помощью кислорода молекул неорганических элементов, в частности – молекул углерода и азота, образующихся в результате использования клеткой органики. Об этом природном обстоятельстве бесстрастно свидетельствуют такие вещества, как СО2, СО и NO, которые активнее, чем кислород, связывающиеся с главным веществом эритроцитов - гемоглобином. Если вас заинтересует данная проблема, обратите более пристальное внимание и на следующие дветцитаты: 1. К тому же, и сам «Варбург игнорировал фундаментальный биохимический аспект раковой проблемы, а именно механизмы, ответственные за контролируемый рост нормальных клеток, которые утрачены в раковых клетках. Несомненно, различия в энергетическом обмене, открытые Варбургом, важны, однако, будучи таковыми, они находятся на уровне биохимической организации клетки и недостаточно глубоки, чтобы касаться сердцевины проблемы рака, неконтролируемого роста». 2. «Первичная причина рака» Варбурга — замена дыхания гликолизом — может быть лишь симптомом истинной первичной причины, однако не является таковой сама по себе. Первичную причину следует искать на уровне контроля генной экспрессии, детали которой пока не известны. Таково, в частности, мнение лауреата Нобелевской премии и в прошлом — коллеги Варбурга по работе Н. Kjebs (1972)». Данные цитаты взяты мною уже из книги Сейц И.Ф., Князев П.Г. Молекулярная онкология. - М.: Медицина, 1986. - 353 с. С наилучшими пожеланиями Телепнева Людмила Георгиевна

Екатерина Малая - Руденко

Очень интересные исследования проведены авторами, предоставлено большое количество рисунков, в тоже время присутствуют орфографические ошибки. Хотелось бы получить уточнение по вопросу, в какой области (шею, внутреннюю поверхность бедра, за ухом) было произведено заражение подопытного животного (№1)? Так как из рис. 26, индекс пролиферации сильнее выражен в нижнечелюстных лимфатических узлах (данное поражение характерно при оральном пути заражения) как и у других подопытных животных, хотя пути заражения у них разные.

Рыжова Елена Валерьевна

Уважаемая Екатерина Орестовна, благодарим за проявленный интерес к нашей работе. Заражение животного №1 , проводили внутримышечно в среднюю треть шеи с левой стороны. Однако не смотря на разные способы заражения животных, у всех заболевание протекало в острой форме. С уважением, Рыжова Е.В.

Тестов Борис Викторович

Материал очень хороший. Жалко только, что авторы не сказали является ли уменьшение числа лимфоцитов основной или сопутствующей причиной заболевания.

Рыжова Елена Валерьевна

Уважаемый Борис Викторович, спасибо за внимание к нашей работе. Клетками - мишенями для вируса АЧС являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов: моноциты крови, а также макрофаги. Разрушение макрофагов вызывает высвобождение цитокинов и фактора некроза опухолей, индуцирующих апоптоз сначала Т - клеток, а потом и В - клеток, т.об. снижение количества лимфоцитов является следствием заболевания.
Комментарии: 6

Телепнева Людмила Георгиевна

Уважаемая Елена Валерьевна! Давно не видела таких прекрасных иллюстраций апоптоза, несмотря на то, что с его проявлениями пришлось познакомиться более двух десятилетий тому назад, еще до изучения мною проблем, связанных с ВИЧ-инфекцией. Своими талантливо и тщательно продуманными экспериментами Вы, в очередной раз, подтвердили, что болезнь, вызванная патогеном, для которого клетками-мишенями являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов (моноциты крови, а также макрофаги), обязательно сопровождаются специфическим нарушением лимфатических узлов. Действительно, как и при ВИЧ-инфекции, при африканской чуме свиней, снижение количества В-лимфоцитов является следствием заболевания, поскольку разрушение макрофагов всегда сопровождается высвобождением цитокинов и фактора некроза опухолей, индуцирующих апоптоз сначала Т- клеток, а потом и В– клеток. Помимо этого, объединяют две эти инфекции и тот факт, что их возбудители – представители Царства Вира. Это - вирус семейства Asfarviridae, рода Asfivirus; (единственный в роду и семействе, по номенклатуре 2000 г.) имеющий размер вириона икосаэдрической формы 175—215 нм. и содержащий двунитчатую молекулу ДНК, состоящую из 170-190 тыс пар нуклеотидов. Зрелые вирионы вируса иммунодефицита человека имеют сферическую форму, их размеры не превышают 100-120 им в диаметре. Геном вируса иммунодефицита человека образуют две нити +РНК; связанные друг с другом при помощи двух белков: рб и р7. В этой связи обращаю внимание на тот факт, что вирусемия – циркуляция вируса в крови, связанная с размножением вирусов во внутренних органах и их выходом из разрушенных или поврежденных клеток, обнаруживается при многих вирусных инфекциях, в том числе и при названных мною заболеваниях. Вместе с тем, при попадании в кровь и возникновении вирусемии, являющейся необходимым условием эпидемического распространения возбудителей при трансмиссивных инфекциях, велика вероятность контакта возбудителей этих заболеваний именно с эритроцитами - самой многочисленной и долгоживущей популяцией клеток крови. Так, известно, что в организме здорового человека находится 2,Зх1013 эритроцитов, что в сотни раз больше, чем количество лейкоцитов, а площадь поверхности всех эритроцитов составляет 3800 м2, что в 2000 раз превышает поверхность тела взрослого человека. Попутно замечу, что скорость движения эритроцитов по кровеносной системе позволяет им совершать один кругооборот по сосудистой системе человека за 50 секунд. Благодаря этим обстоятельствам потенциальные возможности эритроцитов для взаимодействия с микробами, попавшими в кровеносное русло, очень велики. Помимо этого, параллельная закладка тканей и органов с кровеносной системой, способна привести к тому, что эти клеточные территории организма будут в дальнейшем обслуживаться не только тканевыми макрофагими, но и их тканевыми эритроцитами - единственными клетками крови, лишенными не только ядра, но и части других клеточных составляющих. В силу этих предположений интересно было бы исследовать, чем же отличаются фрагменты эритроцитов, поглощенных макрофагами в исследуемых Вами лимфоузлах, расположенных в разных участках организма свиней. Ваша работа в этом направлении могла бы экспериментально подтвердить не только данное и давнее предположение харьковских и винницких медиков, но и эритроцитарную теорию развития ракового процесса, которую поддерживаю (благодаря чему и отыскала совсем недавно в недрах Интернета). Довожу до Вашего сведения краткие данные об её авторе. Это - отличный хирург, онколог и трансфузиолог Жогов Владимир Алексеевич docto.rzogov@mail.ru. Сейчас его предположение отвергают, заявляя, что «отношение эритроцитов к возникновению ракового заболевания опровергается самой природой. Существует достаточно случаев возникновения рака в отсутствии кровеносной системы. Именно на этом строилась одна из первых классических раковых теорий – гипотеза Варбурга». Однако, по моему глубокому убеждению, текст цитаты (теперь уже второй по счету): «Рак, в отличие от других заболеваний, имеет бесчисленное множество вторичных причин возникновения. Но, даже для рака, есть всего одна основная причина. Иначе говоря, основная причина рака — это замена дыхания с использованием кислорода в теле нормальной клетки на другой тип энергетики — ферментацию глюкозы», как раз то и свидетельствует об усилении метаболизма в раковой клетке в случае появления у нее дополнительных тканевых маркеров, т. е. противоречит выделенным мною жирным шрифтом умопостроениям первой цитаты. Конечно. цитата, тем более взятая из текста ученого, трудам которого доверяешь, вещь, хорошая, но и чтение всего текста, из которого она взята, тоже лишним никогда не оказывается. Поэтому сообщаю вам, что вторая по счету цитата была позаимствована мною из текста лекции «The Prime Cause and Prevention of Cancer - Part 1 with two prefaces on prevention», прочитанной 30 июня 1966 года Нобелевским лауреатом, Отто Варбургом. А выделила в ней часть текста наклонным шрифтом намеренно, поскольку эритроциты и были то востребованы природой именно для выноса с помощью кислорода молекул неорганических элементов, в частности – молекул углерода и азота, образующихся в результате использования клеткой органики. Об этом природном обстоятельстве бесстрастно свидетельствуют такие вещества, как СО2, СО и NO, которые активнее, чем кислород, связывающиеся с главным веществом эритроцитов - гемоглобином. Если вас заинтересует данная проблема, обратите более пристальное внимание и на следующие дветцитаты: 1. К тому же, и сам «Варбург игнорировал фундаментальный биохимический аспект раковой проблемы, а именно механизмы, ответственные за контролируемый рост нормальных клеток, которые утрачены в раковых клетках. Несомненно, различия в энергетическом обмене, открытые Варбургом, важны, однако, будучи таковыми, они находятся на уровне биохимической организации клетки и недостаточно глубоки, чтобы касаться сердцевины проблемы рака, неконтролируемого роста». 2. «Первичная причина рака» Варбурга — замена дыхания гликолизом — может быть лишь симптомом истинной первичной причины, однако не является таковой сама по себе. Первичную причину следует искать на уровне контроля генной экспрессии, детали которой пока не известны. Таково, в частности, мнение лауреата Нобелевской премии и в прошлом — коллеги Варбурга по работе Н. Kjebs (1972)». Данные цитаты взяты мною уже из книги Сейц И.Ф., Князев П.Г. Молекулярная онкология. - М.: Медицина, 1986. - 353 с. С наилучшими пожеланиями Телепнева Людмила Георгиевна

Телепнева Людмила Георгиевна

Уважаемая Елена Валерьевна! Давно не видела таких прекрасных иллюстраций апоптоза, несмотря на то, что с его проявлениями пришлось познакомиться более двух десятилетий тому назад, еще до изучения мною проблем, связанных с ВИЧ-инфекцией. Своими талантливо и тщательно продуманными экспериментами Вы, в очередной раз, подтвердили, что болезнь, вызванная патогеном, для которого клетками-мишенями являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов (моноциты крови, а также макрофаги), обязательно сопровождаются специфическим нарушением лимфатических узлов. Действительно, как и при ВИЧ-инфекции, при африканской чуме свиней, снижение количества В-лимфоцитов является следствием заболевания, поскольку разрушение макрофагов всегда сопровождается высвобождением цитокинов и фактора некроза опухолей, индуцирующих апоптоз сначала Т- клеток, а потом и В– клеток. Помимо этого, объединяют две эти инфекции и тот факт, что их возбудители – представители Царства Вира. Это - вирус семейства Asfarviridae, рода Asfivirus; (единственный в роду и семействе, по номенклатуре 2000 г.) имеющий размер вириона икосаэдрической формы 175—215 нм. и содержащий двунитчатую молекулу ДНК, состоящую из 170-190 тыс пар нуклеотидов. Зрелые вирионы вируса иммунодефицита человека имеют сферическую форму, их размеры не превышают 100-120 им в диаметре. Геном вируса иммунодефицита человека образуют две нити +РНК; связанные друг с другом при помощи двух белков: рб и р7. В этой связи обращаю внимание на тот факт, что вирусемия – циркуляция вируса в крови, связанная с размножением вирусов во внутренних органах и их выходом из разрушенных или поврежденных клеток, обнаруживается при многих вирусных инфекциях, в том числе и при названных мною заболеваниях. Вместе с тем, при попадании в кровь и возникновении вирусемии, являющейся необходимым условием эпидемического распространения возбудителей при трансмиссивных инфекциях, велика вероятность контакта возбудителей этих заболеваний именно с эритроцитами - самой многочисленной и долгоживущей популяцией клеток крови. Так, известно, что в организме здорового человека находится 2,Зх1013 эритроцитов, что в сотни раз больше, чем количество лейкоцитов, а площадь поверхности всех эритроцитов составляет 3800 м2, что в 2000 раз превышает поверхность тела взрослого человека. Попутно замечу, что скорость движения эритроцитов по кровеносной системе позволяет им совершать один кругооборот по сосудистой системе человека за 50 секунд. Благодаря этим обстоятельствам потенциальные возможности эритроцитов для взаимодействия с микробами, попавшими в кровеносное русло, очень велики. Помимо этого, параллельная закладка тканей и органов с кровеносной системой, способна привести к тому, что эти клеточные территории организма будут в дальнейшем обслуживаться не только тканевыми макрофагими, но и их тканевыми эритроцитами - единственными клетками крови, лишенными не только ядра, но и части других клеточных составляющих. В силу этих предположений интересно было бы исследовать, чем же отличаются фрагменты эритроцитов, поглощенных макрофагами в исследуемых Вами лимфоузлах, расположенных в разных участках организма свиней. Ваша работа в этом направлении могла бы экспериментально подтвердить не только данное и давнее предположение харьковских и винницких медиков, но и эритроцитарную теорию развития ракового процесса, которую поддерживаю (благодаря чему и отыскала совсем недавно в недрах Интернета). Довожу до Вашего сведения краткие данные об её авторе. Это - отличный хирург, онколог и трансфузиолог Жогов Владимир Алексеевич docto.rzogov@mail.ru. Сейчас его предположение отвергают, заявляя, что «отношение эритроцитов к возникновению ракового заболевания опровергается самой природой. Существует достаточно случаев возникновения рака в отсутствии кровеносной системы. Именно на этом строилась одна из первых классических раковых теорий – гипотеза Варбурга». Однако, по моему глубокому убеждению, текст цитаты (теперь уже второй по счету): «Рак, в отличие от других заболеваний, имеет бесчисленное множество вторичных причин возникновения. Но, даже для рака, есть всего одна основная причина. Иначе говоря, основная причина рака — это замена дыхания с использованием кислорода в теле нормальной клетки на другой тип энергетики — ферментацию глюкозы», как раз то и свидетельствует об усилении метаболизма в раковой клетке в случае появления у нее дополнительных тканевых маркеров, т. е. противоречит выделенным мною жирным шрифтом умопостроениям первой цитаты. Конечно. цитата, тем более взятая из текста ученого, трудам которого доверяешь, вещь, хорошая, но и чтение всего текста, из которого она взята, тоже лишним никогда не оказывается. Поэтому сообщаю вам, что вторая по счету цитата была позаимствована мною из текста лекции «The Prime Cause and Prevention of Cancer - Part 1 with two prefaces on prevention», прочитанной 30 июня 1966 года Нобелевским лауреатом, Отто Варбургом. А выделила в ней часть текста наклонным шрифтом намеренно, поскольку эритроциты и были то востребованы природой именно для выноса с помощью кислорода молекул неорганических элементов, в частности – молекул углерода и азота, образующихся в результате использования клеткой органики. Об этом природном обстоятельстве бесстрастно свидетельствуют такие вещества, как СО2, СО и NO, которые активнее, чем кислород, связывающиеся с главным веществом эритроцитов - гемоглобином. Если вас заинтересует данная проблема, обратите более пристальное внимание и на следующие дветцитаты: 1. К тому же, и сам «Варбург игнорировал фундаментальный биохимический аспект раковой проблемы, а именно механизмы, ответственные за контролируемый рост нормальных клеток, которые утрачены в раковых клетках. Несомненно, различия в энергетическом обмене, открытые Варбургом, важны, однако, будучи таковыми, они находятся на уровне биохимической организации клетки и недостаточно глубоки, чтобы касаться сердцевины проблемы рака, неконтролируемого роста». 2. «Первичная причина рака» Варбурга — замена дыхания гликолизом — может быть лишь симптомом истинной первичной причины, однако не является таковой сама по себе. Первичную причину следует искать на уровне контроля генной экспрессии, детали которой пока не известны. Таково, в частности, мнение лауреата Нобелевской премии и в прошлом — коллеги Варбурга по работе Н. Kjebs (1972)». Данные цитаты взяты мною уже из книги Сейц И.Ф., Князев П.Г. Молекулярная онкология. - М.: Медицина, 1986. - 353 с. С наилучшими пожеланиями Телепнева Людмила Георгиевна

Екатерина Малая - Руденко

Очень интересные исследования проведены авторами, предоставлено большое количество рисунков, в тоже время присутствуют орфографические ошибки. Хотелось бы получить уточнение по вопросу, в какой области (шею, внутреннюю поверхность бедра, за ухом) было произведено заражение подопытного животного (№1)? Так как из рис. 26, индекс пролиферации сильнее выражен в нижнечелюстных лимфатических узлах (данное поражение характерно при оральном пути заражения) как и у других подопытных животных, хотя пути заражения у них разные.

Рыжова Елена Валерьевна

Уважаемая Екатерина Орестовна, благодарим за проявленный интерес к нашей работе. Заражение животного №1 , проводили внутримышечно в среднюю треть шеи с левой стороны. Однако не смотря на разные способы заражения животных, у всех заболевание протекало в острой форме. С уважением, Рыжова Е.В.

Тестов Борис Викторович

Материал очень хороший. Жалко только, что авторы не сказали является ли уменьшение числа лимфоцитов основной или сопутствующей причиной заболевания.

Рыжова Елена Валерьевна

Уважаемый Борис Викторович, спасибо за внимание к нашей работе. Клетками - мишенями для вируса АЧС являются клетки системы мононуклеарных фагоцитов: моноциты крови, а также макрофаги. Разрушение макрофагов вызывает высвобождение цитокинов и фактора некроза опухолей, индуцирующих апоптоз сначала Т - клеток, а потом и В - клеток, т.об. снижение количества лимфоцитов является следствием заболевания.
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.