facebook
twitter
vk
instagram
linkedin
google+
tumblr
akademia
youtube
skype
mendeley
Wiki
Global international scientific
analytical project
GISAP
GISAP logotip

РОЛЬ И ЗНАЧЕНИЕ Л-ФОРМ БАКТЕРИЙ В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

Автор Доклада: 
Душаева Л. Ж.
Награда: 
РОЛЬ И ЗНАЧЕНИЕ Л-ФОРМ БАКТЕРИЙ В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

Удк 6166:614:9:616

РОЛЬ И ЗНАЧЕНИЕ Л-ФОРМ БАКТЕРИЙ В ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ И ИММУНОЛОГИИ

Душаева Лаура Жанедиловна, докторант
Западно Казахстанский аграрно технический университет имени жангир хана

Оснавной задачей наших исследований, являлось определение роли и значение Л- форм бактерий в инфекционной патологии и иммунологии и Л-формы бактерий могут реверсировать in vivo в исходный вид бактерий с восстановлением вирулентности. Фагоцитированные Л-формы длительно персистируют в вакуолях, не вызывают модификации фагоцита и не обуславливают активации лизосом.
Ключевые слова: Л-формы бактерии, туберкулез, вакуолизация, фагоцитоз, электронная микроскопия

First task of us was defining the role and value of L form of mycobacterium on infectious pathology and immunology. L form of mycobacterium can reverse in vivo to starting appearance of bacterium with reestablishment virulence. Phagocyte L form of mycobacterium are persists in vacuole and do not call modification of phagocyte and do not active the lissome.
Keywords: L form of mycobacterium, tuberculosis, vacuolization, phagocytes, electronic microscopy

Л-формы бактерий включают следующие структурные элементы: большие тела размером от 5 до 35 мкм., а иногда и более, нитевидные структуры длиной до 200 мкм, диаметром от 0,06 до 10,00 мкм, шаровидные или специфические клетки разного размера. Иногда называемые гранулами в размере от 1 до 5 мкм, элементарные тельца размером от 0,2 до 1,0 мкм и бесструктурные или бесклеточные, аморфные массы [1,2,3].
При изучении методом сканирующей электронной микроскопии установили, что колонии Л-форм можно рассматривать как популяцию полиморфных элементов. В процессе их развития наблюдается закономерная смена одних элементов другими: шаро-видные элементы появляются в лаг фазе, преобладают в логарифмической и исчезают в стационарной фазе. Большие тела представлены, главным образом, на начальных этапах формирования колоний, нитевидные присутствуют на всех стадиях роста, но диаметр их увеличивается, структура и количество изменяются в процессе развития. Элемен¬тарные тельца и бесструктурные массы присутствуют во всех фазах роста [4].
При иммуноморфологическом исследовании Л-форм грамотрицательных бактерий характерно наличие материала внутреннего слоя клеточной стенки на всем почти протяжении, наличие в цитоплазме, а иногда и внутри включений, двухконтурных везикул [5,6]. Клеточная стенка у некоторых из них окружена мощным осьмиофильным материалом [6].
У Л-форм бактерии отмечалась развитая сеть внутрицитоплазматических мембран и множественная форма репродукции. При изучении ультра- структуры Л-форм микобактерии выявил ярко выраженный полиморфизм. Л-формы сохраняли редуцированную клеточную стенку, которая имела неровные очертания и разрывы, а цитоплаз¬ма была значительно фрагментирована и вакуолизирована.
Нужно отметить, что при реверсии in vitro вирулентность бактерий значительно ослабляется, тогда как при реверсии in vivo такое ослабление не наблюдается. Этот факт при объяснении механизмов чередования рецидивов и ремиссий, характерных для многих хронических инфекционных болезней (сепсис, туберкулез, бруцеллез, склеродермия, саркоидоз, эндокардиты, пиелонефриты различной этиологии) имеет очень большое значение. Для Л-форм бактерий характерны разнообразные способы репродукции: бинарное равновеликое деление, бинарное неравновеликое деление, множественное деление, почкование, образование дочерних клеток в цитоплазме материнской клетки, образование нескольких дочерних клеток, окруженных общей мембраной, комбинация нескольких дочерних клеток, окруженных общей мембраной, комбинация нескольких типов деления. Следует отметить, что отличительным свойством репродукции Л-форм бактерий является не равноценность по размеру образующихся дочерних особей и наличии или отсутствие нуклеотида, то есть по жизнеспособности. [7, 8, 9].
Для возбудителей целого ряда инфекций показана возможность их существования в организме больных в виде Л-форм: менингококки, гонококки, листерии, бруцеллы, стрептококки. Морфологические изменения, вызываемые Л-формами бактерий освещены в доступной литературе крайне мало. Имеются лишь единичные сообщения в отношении патологии различных органов, обусловленные Л-формами бактерий. Так, в экспериментах нестабильные Л-формы вызывают в легких аллергические явления, на фоне которых развивается милиарный туберкулез с острой гематогенной диссеминацией продуктивных бугорков и характерный туберкулезный васкулит. В терминальной фазе появляются неспецифические и аллергические изменения, которые сопровождаются нагноением и некрозом стенок сосудов. Вскрытие трупов лабораторных животных показало, что Л-формы и ревертанты культур микобактерий вызывали образование единичных или множественных очажков некроза в печени, и легких, характерных для туберкулеза. Однако эти изменения были менее выраженными, чем у контрольной группы. Также, нужно отметить, что присутствие Л-форм в организме может оказывать повреждающее действие на ткани и, следовательно, вызвать нару¬шение функции различных органов. Отличительной особенностью процес¬сов, вызванных Л-формами, являются более длительный период инкуба¬ции, менее острое, но более продолжительное течение, меньшая смерт¬ность и более длительное сохранение остаточных явлений. Внутрибрюшинное заражение морских свинок и кроликов Л-формой микобактерий туберкулеза обусловило через 1 месяц возникновение умеренно выраженных лимфоидно-гиперпластических и пролиферативных процессов в иммунокомпетентных и паренхиматозных органах, а также изменений, свидетельствующих о развитии гиперчувствительно¬сти замедленного типа.
При внутрибрюшинном заражении мышей Л-формами стрептококка наблюдали в сердце аллергический интерстициальный и паренхиматозный миокардит, а в почках гломерулонефрит на фоне нарушения микроциркуляции. При этом в лимфоузлах регист-рировались увеличение числа светлых центров фолликулов, образова¬ние их в мозговом слое, выраженная макрофагальная реакция, плазматизация клеточных элементов, набухание стенки сосудов и расширение просвета синусов с десквамацией в них эндотелиальных клеток. Эти изменения авторы относят к явлениям гиперчувствительности замед¬ленного типа. У телят, полученных от коров, больных туберкулезом, в лимфоузлах легких обнаруживались Л-формы микобактерий, что свидетельствует о проницаемости плацентарного барьера и внутриутробной персистенции Л-форм. Рисунок 1,2.
Полагают, что течение листериозной инфекции у павших ягнят, зараженных Л-формами листерий, сопровождалось развитием ярко выраженных явлений интоксикации, отражени¬ем которой явилось истощение организма, дистрофическо - некротические изменения во внутренних органах, атрофия лимфоидной ткани и поражение кровеносной системы.
Л-формы бруцелл растут на полутвердой среде с пенициллином в виде мелких плоских колоний с просветлением среды, имеющих мелкозернистую структуру с гомогенным центром.Большое значение приобретает изучение возможности Л-трансформации бактерий, возбудителей инфекционных болезней, с хроническим рецидивирующим течением, к которым относится и возбудитель туберкулеза.Учеными исследователями были выделены три этапа Л-трансформации: начальный (1-4 пассажей), средний (5 - 10 пассажей) и поздний (11 и более пассажей). На всех этапах Л-трансформации отме¬чалось сохранение клеточной стенки, то есть ее пластического слоя. На последнем этапе образуются формы несбалансированного роста, сферопласты и клетки типичные для Л-культур. На среднем этапе появляются крупные шаровидные клетки и большие тела, а формы несбалансированного роста и сферопласты отсутствуют. На крупных шаровидных клетках имеются впадины - лунки. На позднем этапе имеющиеся клеточ¬ные элементы деформируются, многие имеют сквозные отверстия. Поверхность морщинистая, форма их становится неправильной, имеются бесструктурные массы. Также одновременно происходят изменения в способности к реверсии. Л-культуры в первом этапе реверсируют очень быстро, в среднем реверсия замедляется, а в позднем этапе происходит с трудом.[8]
Репродуктивная способность и агглютинабельность с антибактериальной сывороткой Л-культур микобактерии на всех этапах Л-трансформации оставались неизменным, что является доказательством длительной персистенции их в организме чувствительных животных.
Сопоставляя на питательных средах способность к реверсии у Л-форм, индуцированных in vitro и спонтанно возникших в организме животных, обнаружил, что происхождение тран¬сформированных клеток существенным образом влияет на восстановление их первоначальных свойств. Если экспериментально индуцированные культуры реверсировали за 2 - 3 , реже 15 - 20 пересевов в течение 1-2 месяцев, то спонтанно возникшие в организме - в течение не¬скольких месяцев и даже 3-5 лет, причем не все культуры. Авторами в экспериментах установлено, что у морских свинок, зараженных Л-формами микобактерии, синтезировались полные и неполные антитела, относящиеся к макро и микроглобулинам. Все эти факты свидетельствует об антигенной активности Л-форм микобактерии. При исследовании напряженности иммунитета авторами установлено, что у животных с 4-х месячной давностью Л-инфекции остались иммунными три морские свинки из пяти, тогда как из числа животных с 6 месячной давностью ни одно не заразилось. Рисунок 3.
Выявлено, что микобактерии в результате длительного пассирования на средах с высокими концентрациями пенициллина утрачивают вирулентность и способность к диссеминации в организме животных. На основании этого S.Roux, J.Sassine делают вывод, что Л-формы не играют существенной роли в патогенезе бруцеллеза.
Л-формы микобактерии способны вызывать у морских свинок достаточ¬но напряженный иммунитет до 10 месяцев. Наличия противотуберкулезного иммунитета у вакцинированных БЦЖ людей и животных считают персистенцию в организме привитых микобактерий БЦЖ в виде Л-форм. При иммуноморфологическом исследовании органов и тканей животных, привитых Л-формами микобактерии. Так, Л-формы микобактерии вацины БЦЖ иммуноморфологические изменения в организме вакцинированных животных и способство¬вали созданию противобруцеллезного иммунитета. Прививка форм микобактерии стимулировало повышение уровня содержания Т- и В-лимфоцитов в периферической крови. В то же время, введение Л-форм приводило к возникно¬вению дистрофических, некротических изменений и геморрагии в парен¬химатозных органах. При введении морским свинкам Л-форм микобактерии, по сравнению с вакцинными штаммами, характерные проявления иммуноморфологических перестроек организма и сроки максимального образования антителообразующих клеток в лимфоидных органах задерживались на 1 (одну) неделю и больше.
Вопрос о Л-формах и их роли в инфекционной патологии и иммунологии в последнее время привлекает большое внимание.Значение Л-форм бактерий в инфекционной патологии определяется их па¬тогенными свойствами, способностью длительно сохраняться в определенной среде и, что особенно важно, реверсировать в бактериальную культуру исходного микробного вида с восстановлением частично утра-ченной вирулентности. Принципиальной особенностью этого процесса являет¬ся полная или частичная утрата ригидной клеточной стенки и образо¬вание вполне жизнеспособных вариантов выживания и размножения бактерий. В этом и заключается биологическое значение Л-трансформации. Способность превращаться в Л-форму - свойство, присущее всем микроорганизмам. Переход в Л-форму не считается патологическим состоянием микробов. Л-формы бактерий рассматривают как закодированную в их геноме форму существования бактерий, проявляющуюся в определенных условиях, являясь высоко целесообразной реакцией клеток и популяций в целом на воздействие известных факторов, способных вызывать Л-трансформацию, систематизируя литературные данные и результаты собственных исследований, предложили классификацию стадий формирования и стабилизации Л-форм, основанную на морфологии клеток: формы несбалансированного роста сферопласты- протопласты - незавершенные Л-формы - нестабильные Л-формы - условно-стабильные Л-формы - стабильные Л-формы. Сам процесс образования Л-форм разделили на три фазы, каждая из которых включает в себя различные проявления в изменении бактериального фенотипа: фаза сбалансированного роста - включает в себя все морфологические варианты бактериальной популяции, фаза несбалансированного роста Л- формы несбалансированного роста (гетероморфные формы), сферопласты, протопласты, незавершенные Л-формы, Л-фаза незавершенные Л-формы, нестабильные Л-формы, условно- стабильные Л-формы и стабильные Л-формы.
Особо нужно отметить, что Л-формы бактерий морфологически отличаются от исходного микробного вида. Они нечувствительны к индицированию их препаратами, характеризуются некоторым дефектом метаболических процессов, которые, по сравнению с исходной бактериальной культу¬рой, находятся у них на более низком энергетическом уровне, облада¬ют ослабленной вирулентностью [9].
В последнее время были установлены ряд факторов, индуцирующих Л-трансформацию микробов. Пенициллин считается наиболее универсаль¬ным Л- трансформирующим агентом, использованным для получения Л-форм практически всех видов патогенных бактерий. Точкой его приложения, и для большинства других Трансформирующих агентов, является пептидогликан, который определяет ригидность и структурную целостность клеточной стенки .
Л-формы растут в виде характерных Л-колоний с врастающим в среду слегка пигментированным центром и нежным, прозрачным как бы кружевным краем, данные.
Многими исследованиями было установлено, что для обра¬зования Л-форм бактерий, помимо воздействия самого Л- трансформирующего агента, большое значение имеет состав питательной среды .
При сравнительном изучении Л-форм грамположительных и грамотрицательных бактерий авторам не удалось выделить отличительные особенности между ними. По сравнению с бактериальными формами, у всех Л-форм обнаружен ряд характерных черт: ярко выраженный полиморфизм, значительная деградация клеточной стенки или полное ее отсутствие, измененная система внутрицитоплазматических мембран и большое разнообразие способов деления клеток. В качестве факторов Л-трансформации в организме могут выступать аминокислоты (глицин, лейцин, лизоцим), специфические иммуноглобулины и комплемент, Л-трансформация может активно происходить под действи¬ем желудочного сока, ферментов и других биологически активных эле¬ментов живых клеточных систем. Л-трансформация может также происхо¬дить под действием химических веществ (едкого натра, фенола) и ультрафиолетовых лучей .
Окончательным этапом цикла Л-трансформации является образование типичных Л-колоний, способных расти в субкультурах на питательных средах и состоящих из комплексов микроскопических структур, включающих разнообразные вакуолизированные и шаровидные формы, бесформенные образования и зернистые элементы.
Для правильной оценки эпизоотического состояния хозяйств по инфекционным болезням крупного рогатого скота необходимо проводить исследования на выделение из патологического материала бактериальных культур и Л-форм бактерий в срезах тканей животных, инфицированных эти¬ми агентами, необходимо использовать метод окраски по методу Мурахаси, сочетающий в себе способности выявлять возбудителей болезней с сохранением осмотической хрупкой стенки сферических образований .
Потому, изучение Л-форм как вакцинных микобактерии, в последнее время является актуальной. Поскольку отсутствие достаточных знаний об их условиях образования и свойствах, а также надежных методов и средств их выявления не позволяют пока оценить истинное значение Л-форм в эпизоотическом процессе и эффективности противобруцеллезных мероприятий.

Литература:
1) Авилов В.М., Седов В.А. Актуальные проблемы профилактики особо опасных инфекций у животных // Ветеринария, 1994, №6, С.3 - 6.
2) Краскина Н.А., Эегер Э., Лопатина Т.К. Иммуномодулирующие свойства вакцинных препаратов // I Всес. иммунол. съезд, Сочи, 1989, Т.1, М., 1989, С.322.
3) Идрисов Г.З. Иммуноморфологическая оценка новых моно- и ассоциированных вакцин при различных способах введения их организм сельскохозяйственных животных. Автореф. дис. докт. вет. наук. Казань, 1977, 37 с.
4) Алексеев К.К., Лукин А.К. Применение вакцины из штамма 82 против бруцеллеза крупного рогатого скота // Ветеринария, 1980, №8, С.24-26.
5) Гринько В.К., Назарова С.А., Яраев Р.Г и соавт. Изучение эффективности иммунизации крупного рогатого скота вакциной из штамма 19 в малой дозе. В кн.: Актуальные проблемы ветеринарной науки и практики. Тез. докл. научно-практ. конф., 1987, С.87.
6) Тавамайшвилли М.Е. Иммунитет у коз после прививки вакцины из штамма Рев-1 // Ветеринария, 1987, №8, С.33. Белозерова Г.А. Получение и испытание живой вакцины против бруцеллеза из штамма 82-П4. Автореф. дисс. докт. вет. наук. Казань, 1993, 38 с.
7) Белозерова Г.А., Мальцев Т.С., Салахутдинов Р.А. Агглютиногенные свойства противобруцеллезных вакцин при прививке овцематок // Матер.респ. научно-практ. конф.по акт. пробл. ветер. и зоотех. Казань, 1996, С.8.
8) Гринько В.К., Назарова С.А., Яраев Р.Г и соавт. Изучение эффективности иммунизации крупного рогатого скота вакциной из штамма 19 в малой дозе. В кн.: Актуальные проблемы ветеринарной науки и практики. Тез. докл. научно-практ. конф., 1987, С.87.
9) Тавамайшвилли М.Е. Иммунитет у коз после прививки вакцины из штамма Рев-1 // Ветеринария, 1987, №8, С.33.  

8
Ваша оценка: Нет Средняя: 8 (1 голос)

Здраствуйте , спасибо за ваше

Здраствуйте , спасибо за ваше мнение но рисунки не загрузились по техническим причинам.
c уважением Душаева Лаура

Уважаемая Лаура

Уважаемая Лаура Душаева! Статья довольно интересная и современная, поскольку Л-трансформация бактерий являются актуальной проблемой современной микробиологии и иммунологии. Хотел бы уточнить некоторые моменты: В аннотации Вашей статьи написано, что "Оснавной задачей наших исследований, являлось определение....." из чего подразумевается , что речь будет идти о Ваших собственных, экспериментальных данных, однако как видно у Вас обзорная статья с анализом литературных данных. В 6-ом абзаце статьи написано " Рисунок 1,2." однако никаких фото-приложений нет в статье.
Партнеры
 
 
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
image
Would you like to know all the news about GISAP project and be up to date of all news from GISAP? Register for free news right now and you will be receiving them on your e-mail right away as soon as they are published on GISAP portal.